一种利用高温花生粕制备高水解度功能性短肽的方法

摘要

一种利用高温花生粕制备高水解度功能性短肽的方法，涉及短肽。1）将高温花生粕粉碎，加入水，得花生粕粉料液，浸提后料液离心，取上清液，静置酸沉，再离心，收集沉淀，沉淀用水洗至中性，干燥后得花生蛋白粉；2）将步骤1）得到的花生蛋白粉进行亚硫酸钠前处理，得花生蛋白液；3）在步骤2）得到的前处理后的花生蛋白液中加入碱性蛋白酶，进行第一次酶解，再加入菠萝蛋白酶，进行第二次酶解，料液升温灭酶，停止酶解，得花生蛋白酶解液；4）将步骤3）所得花生蛋白酶解液离心，收取上清液，超滤，收集超滤透过液，再纳滤脱盐处理，收集纳滤截留液；5）将纳滤截留液冷冻干燥，即得高水解度功能性短肽。操作方便、条件温和、处理速度快。

主权项

一种利用高温花生粕制备高水解度功能性短肽的方法，其特征在于包括以下步骤：1)将高温花生粕粉碎，加入去离子水，得花生粕粉料液，调节pH为9.0～11.0，在40～60℃下浸提2h后，料液离心，取上清液，静置酸沉，再离心，收集沉淀，沉淀用水洗至中性，干燥后得花生蛋白粉；所述高温花生粕粉碎至80目，所述高温花生粕与去离子水的配比为1:8～12；所述料液离心的条件为3000rpm、15min；所述上清液调节pH值至4.5；所述静置酸沉的时间为30min；所述再离心的条件为4000rpm、10min；所述干燥采用冷冻干燥；2)将步骤1)得到的花生蛋白粉溶解在去离子水中配制成浓度为3％～5％的花生蛋白液，加热至50℃后，向花生蛋白液中加入Na₂SO₃至终浓度为0.04％～0.10％，并持续恒温搅拌1h，得前处理后的花生蛋白液；3)在步骤2)得到的前处理后的花生蛋白液中，加入碱性蛋白酶，进行第一次酶解，再加入菠萝蛋白酶，进行第二次酶解，料液升温灭酶，停止酶解，得花生蛋白酶解液；所述加入碱性蛋白酶的量按每克花生蛋白加入5000～10000U/g酶；所述第一次酶解的时间为180～240min；所述加入菠萝蛋白酶的温度为40～45℃、pH6.0～7.0，加入菠萝蛋白酶的量按每克花生蛋白加入5000～10000U/g的酶，所述第二次酶解时间为180～240min；所述前处理后的花生蛋白液调节至pH8.0～8.5、温度为50～55℃；所述碱性蛋白酶为Alcalase 2.4，比活力138328U/g；所述菠萝蛋白酶的比活力为49395U/g；在各段酶解过程中温度保持恒定，同时不断搅拌溶液，并通过加入1mol/L的NaOH来维持pH恒定；所述升温灭酶的条件为在90℃下水浴灭酶20min；4)将步骤3)所得花生蛋白酶解液离心，收取上清液，超滤，收集超滤透过液，再纳滤脱盐处理，收集纳滤截留液；所述离心的条件是在12000g条件下离心15min；所述超滤的条件为：采用截留分子量为1kDa的超滤膜，调节花生蛋白酶解液pH为6.8，在超滤压力为0.086～0.193MPa、超滤温度为25～45℃的条件下；5)将纳滤截留液进行冷冻干燥，即得高水解度功能性短肽。