胡萝卜β(1,2)木糖转移酶的基因全序列及用于转染双子叶植物的CRISPR/CAS9 的质粒构建

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及悬浮胡萝卜细胞基因组中β(1,2)木糖转移酶的基因全序列及其相应的用于转染双子叶植物的CRISPR/CAS9的质粒构建。本发明首次发现和确定了胡萝卜β(1,2)木糖转移酶的基因全序列，并针对此序列设计了两个有效的gRNA，合成相应的CRISPR/CAS9质粒，从而达到敲除悬浮胡萝卜细胞基因组中β(1,2)木糖转移酶的目的。本发明还发现β(1,2)木糖转移酶的基因序列中存在两段STR位点，这对于胡萝卜种属鉴定及其进化方面具有重大意义。

主权项

一种分离和测定胡萝卜XylT基因的序列的方法，包括：(1)提取胡萝卜基因组DNA；(2)利用巢式PCR技术获得XylT基因片段，纯化，获得纯化后的XylT基因片段；(3)将获得的纯化后的XylT基因片段进行测序，获得分离的胡萝卜XylT基因的序列。