基于响应面法优化当归总黄酮提取工艺参数的方法

摘要

本发明公开了一种基于响应面法优化当归总黄酮提取工艺参数的方法，采用超声波辅助提取方法，在单因素试验基础上选取对总黄酮提取率影响较大的提取时间、料液比和乙醇体积分数进行考察，通过响应面法建立了总黄酮提取量与三个因素之间关系的二次多项式方程模型，并绘制出三维曲面图，对其综合分析，得出最佳工艺条件：提取时间60min；料液比1:30g/ml；乙醇体积分数80%。本发明利用中心组合试验设计和效应面分析法，借助统计软件Design Expert7.0.0简便、可靠地进行优化试验和数据分析，对“岷归3号”中总黄酮提取的工艺参数进行优化，取得了较好的效果。本发明为“岷归3号”内在质量的评价提供参考，为当归新品种的推广应用奠定基础。

主权项

一种基于响应面法优化当归总黄酮提取工艺参数的方法，本方法所述当归为利用重离子辐照生物育种技术选育出的当归新品种“岷归3号”，为当归Angelica sinensis (Oliv.)Diels的干燥根，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一、药材预处理，称取适量当归药材用水冲洗干净，置于40℃烘箱中烘干至恒重，粉碎，用粒度为60目的筛子筛分后称取2.0g药材粉末；步骤二、采用超声辅助、乙醇溶液浸提药材中黄酮化合物，以步骤一处理好的当归药材总黄酮提取率为响应值，选择药材质量与乙醇溶液体积的料液比、乙醇体积分数和提取时间为响应因素，应用中心复合设计的组合实验设计原理设计三因素五水平实验，采用统计软件Design Expert 7.0.0进行多元回归分析，得出实验因素对响应值影响的回归方程为：式中响应值Y为当归总黄酮提取率，变量参数X₁为料液比、变量参数X₂为乙醇体积分数、变量参数X₃为提取时间，最终确定X₁为1:30g/ml，X₂为80%，X₃为60min，当归总黄酮的提取率为1.0260%；按照所述的变量参数，称取经步骤一预处理的药材粉末2.0g，药材中加入乙醇溶液60ml，乙醇体积分数为80%，放入超声波清洗仪中，设定超声提取时间60min，超声频率为70Hz，进行超声提取总黄酮，过滤，滤渣连同滤纸用同浓度乙醇溶液再次提取，合并滤液，挥去乙醇得黄色粘稠状物质，以同浓度的乙醇溶液转移到100ml的容量瓶中，定容、干燥，制备所得为药材中的总黄酮化合物；步骤三、总黄酮提取率的计算，称取步骤二所制备的干燥的总黄酮50mg，用浓度为85%乙醇溶液溶解并定容于100ml容量瓶中；精密吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml分别定容于25ml 容量瓶中，各取5ml置于10ml具塞试管中，加5g/100ml亚硝酸钠0.3ml，摇匀放置6min，再加10g/100ml硝酸铝0.3ml，摇匀放置6min，最后加体积浓度为4g/100ml的氢氧化钠4.0ml，加水至刻度线，摇匀放置10min后，在510nm处测其吸光度；以芦丁吸光度标准曲线为对照曲线，测定出药材中总黄酮的提取率为1.0260%。