高纯度鲎素提存方法

摘要

本发明涉及提取纯化海洋生物活性成分技术领域，具体的涉及一种高纯度鲎素提存方法。本发明提供的高纯度鲎素提存方法，通过鲎血采集、细胞破碎、收集沉淀、收集上清液、透析、干燥、初次纯化、二次纯化等工艺对鲎素进行提纯，此高纯度鲎素提取方法工艺简单，无需复杂的设备即可实现高纯度的鲎素提取，所提取的鲎素纯度高达95％以上，充分利用了海洋的宝贵资源，所提取的鲎素可用于生物、医疗、健康、科研等方面，具有积极的经济和社会意义。

主权项

高纯度鲎素提存方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1，采用心房取血方式对活体鲎进行鲎血采集，同时加入抗凝血剂；步骤2，将步骤1取得的鲎血与20mmol/L Tris‑HCl、pH8.0、含50mmol/L的NaCl缓冲液混合后进行超声波破碎，低温高速离心，收集沉淀；步骤3，沉淀与含20mmol/L的HCl缓冲液混合均质，将均质液低温高速离心，收集上清液；步骤4，用截留分子量大于等于1000ku透析袋透析上清液后冷冻干燥，即得鲎素粗品；步骤5，将步骤4获得的鲎素粗品配置成母液，上样于平衡过的SephadexG‑50层析柱，洗脱、收集以核酸蛋白仪于280nm处记录图形，收集最后一个峰形较好的峰，透析后冷冻干燥；步骤6，二次纯化，将初次纯化后的产品配置成母液，上样于平衡过的CM‑Sepharose CL‑6B层析柱，洗脱、收集以核酸蛋白仪于280nm处记录图形，收集最后一个峰形较好的峰，透析后冷冻干燥。