主权项 |
一种山药虫草的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)山药虫草母种的制备:a. 分别取山药干粉15~23 g、琼脂15~23 g、葡萄糖15~23 g、硫酸镁0.8~1.2 g放入1000 ml蒸馏水中,加热沸腾,保持10~15 min停火,趁热装管,封口,灭菌,趁热取出摆斜面,冷却凝固形成山药母种斜面培养基;b. 在无菌条件下,将蛹虫草菌株沁虫1号接种于上述斜面培养基上,温度18~20 ℃、完全黑暗的环境中培养8~10天,当菌丝发满斜面培养基表面,即成山药虫草母种;(2)山药虫草液体菌种制备:c. 分别取葡萄糖18~22 g、山药干粉3~5 g、蛋白胨3~5 g、磷酸二氢钾3~5 g、硫酸镁3~5 g、维生素B1 0.01~0.03 g放入1000 ml蒸馏水中,加热沸腾,保持2~3 min停火,然后装入烧瓶中,封口,灭菌,冷却至室温,制成菌种培养液;d. 在无菌条件下在上述菌种培养液中接入步骤(1)制备的山药虫草母种,温度18~22 ℃、自然光照环境中静止培养70~75 h,再无菌空气培养70~75 h,当小米粒状菌球充满培养液时停止通空气,经检验无杂菌感染后即成山药虫草液体菌种;(3)寄生载体山药的制备:将山药表面处理干净,切段扎孔,放入水与蚕蛹粉重量比为15~25:1的混合液中,煮沸,保持10~15 min,捞出,控去水分,装袋,封口,灭菌,即得寄生载体山药;(4)接种:在无菌条件下,将步骤(2)制备的山药虫草液体菌种接种到步骤(3)制备的寄生载体山药上面,接种量为寄生载体山药:液体菌种=800~1000 g:200~250 ml;(5)染菌期培养:接种后在温度18~25 ℃、空气湿度50%~55%、黑暗环境中培养10~12天,白色菌丝发满寄生载体山药表面及内部,发菌培养结束;(6)转色期培养:在温度20~23 ℃、空气湿度60%~65%、光照180~200 lux条件下培养7~8天,白色菌丝转为橘黄色,转色结束;(7)出草期培养:①从原基形成前后到草长到2 cm时,为前期培养阶段,培养条件为:温度20~22 ℃、空气湿度70%~75%、自然光照,培养时间为15~17天;②从草长到2 cm以上直到山药虫草最后成熟为后期培养阶段,培养条件为:温度23~25 ℃、空气湿度80%~85%、自然光照,培养时间为25~27天,当子座顶端膨大,子座色泽变暗,并出现粉末状物时采收,即为山药虫草。 |