基于核酸外切酶III辅助的双循环串联信号放大DNA组合探针组合物及制备方法与应用

摘要

一种基于核酸外切酶III辅助的双循环串联信号放大DNA组合探针组合，包括：包含G‑四链体形成序列的引发DNA探针；发卡DNA探针，3′端与5′端互补形成茎状区，环状区序列与所述引发DNA探针互补；汞离子识别探针，和核酸外切酶III。在少量Hg²⁺引发后，两个自发循环过程可产生大量的G‑四链体DNA探针，与血红素结合产生G‑四链体‑血红素DNA酶，催化ABTS‑H₂O₂反应，生成可通过肉眼观察或分光光度法测定的浅绿色的ABTS^●＋。该方法具有极高的灵敏度和特异性、检测快速、操作简单，适合发展为环境监测现场实时分析技术；特别适合多种重金属离子同时存在的环境，适合应用于多种金属污染物存在时监测Hg离子的环境。

主权项

一种用于免标记Hg²⁺检测的DNA探针组合，包括以下组分：1)引发DNA探针，所述的引发DNA探针包含G‑四链体形成序列；2)发卡DNA探针，所述发卡DNA探针为茎环结构，其3′端与5′端互补形成茎状区，环状区序列与所述引发DNA探针互补；3)汞离子识别探针，所述汞离子识别探针的5′端含有3个连续T碱基，在汞离子存在时，所述汞离子识别探针的5′端与发卡探针的3′端通过形成3个T‑Hg²⁺‑T结构而结合在一起，且在所述发卡DNA探针的3′末端形成平末端；4)核酸外切酶III。