一种制备人妊娠特异性糖蛋白9的方法

摘要

本发明公开了一种制备人妊娠特异性糖蛋白9的方法。该方法包括如下步骤：(1)构建重组菌：将人PSG9蛋白的编码基因导入宿主大肠杆菌中，得到重组菌；(2)重组菌诱导培养：将重组菌用IPTG进行诱导培养，IPTG在菌液中的浓度为3uM，诱导培养的温度为30℃，得到诱导后菌体；(3)蛋白纯化：将诱导后菌体破碎，取上清；将上清用镍柱进行纯化，纯化过程中使用的洗脱液是含有40nM咪唑的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即得到人PSG9蛋白。实验结果表明，本发明方法制备得到的人PSG9蛋白的纯度高，可达27.3mg/L，为后续PSG9在癌症中作用机制研究以及获得高纯度的单克隆抗体奠定了基础。

主权项

一种制备人PSG9蛋白的方法，包括如下步骤：(1)构建重组菌：将人PSG9蛋白的编码基因导入宿主大肠杆菌中，得到重组菌；(2)重组菌诱导培养：将重组菌用IPTG进行诱导培养，IPTG在菌液中的浓度为3μM，诱导培养的温度为30℃，得到诱导后菌体；(3)蛋白纯化：将诱导后菌体破碎，取上清；将上清用镍柱进行纯化，纯化过程中使用的洗脱液是含有40nM咪唑的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即得到人PSG9蛋白；所述人PSG9蛋白的编码基因如SEQ ID NO.1中第1‑1278位核苷酸的DNA分子所示。