一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法

摘要

本发明涉及一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法；利用金纳米粒子和甲胎蛋白标记抗体以及辣根过氧化物酶的静电吸附作用，制备多酶标记的金纳米粒子甲胎蛋白免疫探针，对甲胎蛋白(alpha fetoprotein AFP)，这种广泛存在原发性肝癌的蛋白标志物进行定性定量的检测，建立蛋白标志物检测的新方法，极大程度提高了检测灵敏度。本发明的特点在于：整个制备过程简单，适合于产业化生产；金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体，检测探针将同时具有免疫活性和酶催化活性，所得检测探针为多酶标记探针，实现了纳米领域的纳米增强效应，可有效提高检测灵敏度。

主权项

一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法；其特征是步骤如下：(1)将氯金酸加入到反应器，加热煮沸后注入柠檬酸钠，冷却至室温，得到金纳米粒子(AuNPs)；(2)将上述金纳米粒子加入反应器，通过碳酸钾水溶液调节金纳米粒子pH为8.3～8.5，将甲胎蛋白标记抗体(Ab₁)和辣根过氧化物酶(HRP)混合液与金纳米粒子混合，所得AuNPs、HRP和Ab₁混合液在旋转混合架上旋转混匀后静置处理；(3)将牛血清白蛋白(BSA)加入到上述AuNPs、HRP和Ab₁混合液封闭处理，离心得到多酶标记AuNPs‑HRP‑Ab₁检测探针。