一种非洲菊脱毒幼苗的培育方法

摘要

本发明公开一种非洲菊脱毒幼苗的培育方法，包括非洲菊的花托外植体预处理、接种及诱导培养、转移诱导培养、幼苗的驯化与炼苗等步骤，培育出非洲菊脱毒幼苗。本发明涉及的非洲菊脱毒幼苗的培育方法，避免在培育过程中受病毒、病害因素的干扰，提高愈伤组织的形成数量与效率，培养周期短，提高幼苗成苗率，在非洲菊组培领域具有广阔的应用前景。

主权项

一种非洲菊脱毒幼苗的培育方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)花托外植体预处理：选取直径1～2cm的花蕾，在4℃环境中冷藏3～5天后，将花蕾取出自然恢复至室温，剥去苞片和小花，用纯净水冲洗，先在0.05％的升汞水溶液中消毒5～8min，再用70％的酒精消毒20～40s，之后用无菌水冲洗3次，即得到非洲菊花托外植体，以上涉及的百分比均为体积百分比；(2)外植体接种及诱导培养：将非洲菊花托外植体移入到灭菌后的第一培养基中，将温度设定为23±1℃，以蓝光灯为光源，光照强度控制为400～800Lx，光周期控制为光14h/暗10h，10天左右诱导出愈伤组织；(3)转移诱导培养：将步骤(2)得到的愈伤组织转移到第二培养基，温度为27±1℃，以荧光灯为光源，光照强度控制为1800～2500Lx，光周期控制为光14h/暗10h，14天愈伤组织诱导出嫩芽后，将嫩芽从非洲菊花托外植体上完整地切下，转移到第三培养基内继续以相同的条件培养至形成非洲菊幼苗；(4)幼苗的驯化与炼苗：将非洲菊幼苗移栽到炼苗基质中，并逐步转移到外部环境中，在幼苗适应外部环境正常生长后，再移栽至普通土壤中正常培养。