主权项 |
一种番茄植株顶芽内源激素含量的测定方法,其特征在于:包括以下步骤:1)供试番茄顶芽样品前处理;2)配制流动相、设置色谱条件;3)标准液的制备;4)专属性考察;5)线性关系考察;6)样品含量测定;所述步骤1)的方法包括提取、石油醚萃取后进行减压蒸发,再调节pH,并经乙酸乙酯萃取后,最后经二次减压蒸发制成样品待测液;具体方法包括:1‑1)提取:供试番茄顶芽样品1g加入80%冷甲醇中,于4℃下静置16h浸提,抽滤得清液,得粗提取液;1‑2)石油醚萃取:将所述粗提取液用等体积石油醚萃取,弃去醚相,合并水相;1‑3)减压蒸发:将步骤1‑2)所得的所述水相在37℃下旋转蒸发至所述水相体积的1/3~1/4,得一次浓缩液;1‑4)调节pH:将所述一次浓缩液调节pH至2.75~2.85之间;1‑5)乙酸乙酯萃取:将调节好pH的一次浓缩液用等体积乙酸乙酯萃取,弃去水相,合并酯相;1‑6)二次减压蒸发:将步骤1‑5)所得的所述酯相在37℃下旋转蒸发至所述酯相体积的1/4~1/5,得二次浓缩液,用甲醇定容至所述二次浓缩液体积的2倍,制成样品待测液,保存于4℃下棕色瓶中,待测;所述步骤2)中流动相为甲醇与0.075%冰乙酸按体积比为45:55配制而成;色谱条件设置为检测波长210nm,流速为0.7mL/min,进样量为20μL;所述标准液和所述样品含量测定的植物激素包括IAA、ZT、ABA和GA<sub>3</sub>;所述标准液包括:0.1g/L的IAA标准液、0.001g/L的ZT标准液、0.001g/L的ABA标准液和0.01g/L的GA<sub>3</sub>标准液。 |