检测黄牛 Notch1 基因 SNP 位点的 RFLP 方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测黄牛Notch1基因SNP位点的RFLP方法及试剂盒，以黄牛血液全基因组DNA为模板，PCR扩增黄牛Notch1基因NICD区的一段序列，用限制性内切酶HhaI消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定Notch1基因NICD区单核苷酸多态性。该SNP位于功能非常重要的Notch1基因的NICD区，并且与黄牛多种重要经济性状相关，本发明提供的检测方法为Notch1基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，可用于黄牛生长性状的标记辅助选择，以便于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

主权项

检测黄牛Notch1基因SNP位点的RFLP方法，其特征在于：包括以下步骤：以黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，进行PCR扩增，然后利用限制性内切酶HhaI酶切PCR扩增产物，再对酶切后片段进行琼脂糖凝胶电泳，利用凝胶成像系统分析电泳后片段大小，鉴定黄牛Notch1基因单核苷酸多态性：电泳后片段为120bp时为AA基因型，电泳后片段为96bp和24bp时为GG基因型，电泳后片段为120bp、96bp和24bp时为AG基因型；所述的引物对P为：上游引物：5′‑TGCATGGTGCCACCCTGGGCG‑3′下游引物：5′‑TGGTGCTGGGCTTGCGGGCCTTCT‑3′。