一种微生物联合培养生产1,5-戊二胺的方法

摘要

本发明公开了一种微生物联合培养生产1,5‑戊二胺的方法。该方法包括：配种子培养基、发酵培养基、葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液、乳糖诱导液以及赖氨酸溶液；对发酵罐，步骤1中的培养基以及三角瓶灭菌，其中步骤1中发酵培养基中的葡萄糖单独灭菌；取三角烧瓶接入种子培养基，分别接入产丁二酸菌和产赖氨酸脱羧酶菌培养后作为发酵菌种；向装有发酵培养基的发酵罐中通入无菌空气或纯O₂，接入产丁二酸菌和产赖氨酸脱羧酶菌作为出发菌株，并加入葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液和乳糖诱导液，控制菌体比生长速率发酵；厌氧转化阶段，控制葡萄糖浓度和pH即得产物1,5‑戊二胺的方法。本发明方法简单易行，节约成本。

主权项

一种微生物联合培养生产1,5‑戊二胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，配种子培养基、发酵培养基、葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液、乳糖诱导液以及赖氨酸溶液；步骤2，对发酵罐，发酵培养基，种子培养基，葡萄糖补料培养液，甘油补料培养液，乳糖诱导液，赖氨酸溶液以及三角瓶进行灭菌处理，其中发酵培养基中的葡萄糖单独灭菌后再于其他成分合并；步骤3，取两个灭菌后的三角烧瓶，接入灭菌后的种子培养基，分别接入产丁二酸菌和产赖氨酸脱羧酶菌摇床培养后作为发酵菌种；步骤4，将灭过菌的发酵培养基接入发酵罐中，通入无菌空气或纯O₂，再按照接种量总体积比为10%向发酵罐中接入发酵菌种，向发酵罐中加入葡萄糖补料培养液、甘油补料培养液和乳糖诱导液，发酵过程中控制菌体比生长速率，温度，pH和溶氧；步骤5，当菌体干重达到15‑20g/L，停止通无菌空气或纯O₂，转入厌氧转化过程，在此过程中添加葡萄糖补料培养液控制葡萄糖浓度，用赖氨酸溶液来控制pH，发酵24小时得产物1，5‑戊二胺。