基于核糖体展示技术的兔单克隆抗体制备方法

摘要

本发明公开了一种兔单克隆抗体的制备方法，其特征在于采用核糖体展示技术来制备兔单克隆抗体，即通过PCR扩增目的抗体的基因文库，同时加入启动子、核糖体结合位点和茎环，并置于有偶联转录-翻译的无细胞翻译系统中孵育，使目的抗体基因的翻译产物展示在核糖体表面，并形成“mRNA-蛋白质-核糖体”三元复合体，最后利用常规的免疫学检测技术，通过固相化的靶分子直接从三元复合体中筛选出目的核糖体，再利用RT-PCR扩增，进行下一循环的富集和扩增，最终筛选出高亲和力的目标抗体。用该方法制备兔单克隆抗体具有如下优势：一是较原有技术更方便快捷。二是筛选出的抗体可以稳定复制。三是可以实现高通量筛选而获得高亲和力的抗体。

主权项

一种兔单克隆抗体制备方法，其特征在于采用核糖体展示技术来制备兔单克隆抗体，即通过PCR扩增目的抗体的基因文库，同时加入启动子、核糖体结合位点和茎环，并置于有偶联转录‑翻译的无细胞翻译系统中孵育，使目的抗体基因的翻译产物展示在核糖体表面，并形成“mRNA‑蛋白质‑核糖体”三元复合体，最后利用常规的免疫学检测技术，通过固相化的靶分子直接从三元复合体中筛选出目的核糖体，再利用RT‑PCR扩增，进行下一循环的富集和扩增，最终筛选出高亲和力的目标抗体。