性控精液的分离方法

摘要

本发明涉及动物繁殖领域，特别涉及性控精液的分离方法，包括以下步骤：将原精通过40‑60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；检测滤后精液的活力，得到活力为0.6‑0.85的待染色滤后精液；将活力为0.6‑0.85的待染色滤后精液进行染色，得到染色精液；将染色精液使用流式细胞仪分离，得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液。本发明提供的性控精液的分离方法，能够保证待染色滤后精液染色的均匀性和稳定性，进而利于将含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液高效的分离。此外，滤后精液不易出现堵塞流式细胞仪的喷嘴的现象，进而保证整个分离过程的顺畅进行。

主权项

性控精液的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：将原精通过40‑60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；检测所述滤后精液的活力，得到活力为0.6‑0.85的待染色滤后精液；将Staining Talp液和4％Egg yolk Talp液分别在32℃‑36℃的温度下预热10‑20分钟，得到预热后的Staining Talp液和预热后的4％Egg yolk Talp液；在32℃‑36℃的温度下，在所述待染色滤后精液中加入抗生素溶液后再加入荧光染料，混匀后得到初染精液；在所述初染精液中加入所述预热后的Staining Talp液后混匀，孵育40分钟‑50分钟，得到孵育后的精液；在所述孵育后的精液中加入所述预热后的4％Egg yolk Talp液，摇匀后得到染色精液；将所述染色精液使用流式细胞仪分离，得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液；其中，所述抗生素溶液包括泰勒霉素溶液、庆大霉素溶液和由林肯霉素和壮观霉素配成的林肯‑壮观溶液；且所述泰勒霉素溶液、所述庆大霉素溶液和所述林肯‑壮观溶液的体积比为3:3:4；其中，每1000ml Staining Talp液由羟乙基哌嗪乙磺酸9.520g，氯化镁水合物晶体0.080g，氯化钠5.518g，氯化钾0.224g，无水碳酸氢钠0.040g，碳酸氢钠0.840g，丙酮酸0.220克，葡萄糖0.900克，Lactic Acid，60％Syrup 3.610ml，牛血清蛋白3.000g配置而成。