表达抑制昆虫保幼激素甲基转移酶基因的dsRNA的重组杆状病毒

摘要

本发明公开了一种表达抑制昆虫保幼激素甲基转移酶基因（HaJHAMT基因）的dsRNA的重组杆状病毒及其在制备杀虫剂中的应用。本发明提供了一种RNA分子，为如下（a）或（b）：（a）序列表的序列7所示的RNA分子；（b）与序列表的序列7反向互补的RNA分子。编码所述RNA分子的DNA分子也属于本发明的保护范围。含有所述DNA分子的重组载体、重组杆状病毒、表达盒、转基因细胞系或重组菌均属于本发明的保护范围。本发明将棉铃虫作为模式昆虫，通过抑制保幼激素甲基转移酶基因在昆虫体内的表达，可以促进杆状病毒对昆虫的杀虫效力，从而达到控制害虫对农作物危害的目的。本发明对于农业生产具有重大价值。

主权项

一种重组杆状病毒，其特征在于：所述重组杆状病毒为出芽病毒粒子的形式或多角体包涵体的形式；所述重组杆状病毒的出芽病毒粒子通过如下方法制备得到：将特异重组质粒导入昆虫细胞并进行培养，收集培养上清，即为含有所述出芽病毒粒子的病毒液；所述重组杆状病毒的多角体包涵体通过如下方法制备得到：将所述特异重组质粒导入昆虫细胞并进行培养，收集细胞沉淀，细胞沉淀中即含有所述多角体包涵体；所述特异重组质粒中具有表达盒甲和表达盒乙；所述表达盒甲为用于表达特异DNA分子的表达盒；所述表达盒乙为用于表达杆状病毒多角体蛋白的编码基因的表达盒；所述特异DNA分子为如下1)或2)：1)依次由DNA片段Ⅰ、间隔区和DNA片段Ⅱ组成的DNA分子；所述DNA片段Ⅰ如序列表的序列6自5’末端第1‑405位核苷酸所示；所述DNA片段Ⅱ如序列表的序列6自5’末端第630‑1034位核苷酸所示；2)序列表的序列6所示的DNA分子；所述杆状病毒多角体蛋白为由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质。