一种嗜酸乳杆菌冻干保护剂

摘要

本发明公开了一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥保护剂，其含有：1.0‑5.0％海藻糖；5.0‑20.0％脱脂奶粉；2.0‑8.0％蔗糖；0.4‑1.0％D‑异抗坏血酸；0.5‑2.0％谷氨酸钠。本发明提供的冻干保护剂具有体积小、含菌量高、低污染、便于保藏、运输，使用方便等优点。用本发明的冷冻干燥保护剂制备的嗜酸乳杆菌干粉的活菌数可达到4.0×1011CFU/g以上。

主权项

一种嗜酸乳杆菌CGMCC No.5093冷冻干燥方法，其为将嗜酸乳杆菌CGMCC No.5093种子液300mL接种到由10.0 g/L蛋白胨，8.0 g/L牛肉膏，6.0 g/L酵母膏，25.0 g/L葡萄糖，1 mL/L吐温80，3.0 g/L磷酸氢二钾，5.0 g/L三水乙酸钠，2.0 g/L柠檬酸三铵，0.2 g/L七水硫酸镁，0.05 g/L硫酸锰和余量的水组成的4L培养基中，发酵温度，37℃；搅拌速度，50rmp；pH值，6.0~6.5；培养时间，24h，在发酵过程中加入0.5‑1%的CaCO₃，调节pH在6.2~6.5；发酵进行8h后进行补料，加入50%的葡萄糖200mL；发酵完成后在4℃进行发酵液的离心处理，转数为4000rmp，20min，得到菌泥；选取与发酵液同体积的保护剂将离心后的菌泥在无菌条件下稀释均匀成菌悬液，悬浮基质为MRS液体培养基或无菌生理盐水，冻干保护剂由5%的海藻糖、15% 的脱脂奶粉、4% 的蔗糖、1% 的D‑异抗坏血酸和2.0%的谷氨酸钠组成；在‑80℃冷冻冰箱中进行预冷冻处理4h，然后进行真空冷冻干燥，冷阱温度‑50℃左右，真空度20Pa，干燥24h后得到嗜酸乳杆菌干粉。