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一种利用走马胎叶片快速繁殖种苗的方法，其特征在于，包括叶片诱导分化不定芽、不定芽继代增殖、壮苗、生根诱导、移栽和管理过程，其步骤如下：1)、叶片诱导分化不定芽过程取幼嫩的走马胎叶片，清洗消毒后用无菌纸吸干水分，然后沿与叶脉垂直方向切成0.5～1.0㎝×1.0～2.0㎝的小块接种于诱导培养基上诱导分化不定芽，培养温度24～26℃，光照时间10～12h/d，光照强度20～30μmol·m<sup>‑2</sup>·s<sup>‑1</sup>；培养8天后，开始在叶片切口处叶片表面分化不定芽，培养30天后，将分化出不定芽的叶片细切成含有2～4个不定芽的小块后再接种于新鲜诱导培养基进行继代增殖培养，直至形成丛芽；所述诱导培养基是以MS培养基为基本培养基，并添加6‑BA0.5～2.0mg/L、IBA0.1～1.0mg/L、蔗糖30g/L、卡拉胶6.5g/L，pH值为5.8；2)、壮苗培养过程将丛芽切割成小丛后转接到壮苗培养基上进行壮苗培养；所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，并添加6‑BA0.1～0.5mg/L、NAA0.1mg/L、蔗糖30g/L、卡拉胶6.5g/L、10％椰子水，pH5.8；3)、生根诱导过程经壮苗培养的不定芽长到2～3cm高时，单株切取，接种于生根培养基上进行生根培养，培养10d后，开始从切口处产生不定根，培养1个月后形成良好根系，获得完整植株；所述生根培养基是以MS培养基为基本培养基，并添加NAA0.1～0.5mg/L、IBA0.1～1.0mg/L、蔗糖30g/L、卡拉胶6.5g/L，pH 5.8；4)、移栽和管理过程A.移栽：将生根苗连瓶放置在控温大棚中炼苗，一周后将苗移出培养瓶外，洗净小苗根部的培养基，在600倍液的多菌灵溶液中浸泡30s～1min后，移栽到经多菌灵溶液消毒好的栽培基质上；B.栽培基质配比及处理：分别取草炭土、椰糠和河沙，按体积比计：草炭土：椰糠：河沙＝3～5：2～4：1的比例混匀，用多菌灵溶液淋透后盖上薄膜捂3～5d后揭开，用清水淋透后种苗；C.管理：移栽7～10d后，覆盖薄膜保湿，基质湿度保持80％～90％左右，然后逐渐降低到70％；空气湿度90％以上，然后逐渐降低到60％～70％；遮阴60％～70％，然后逐渐减少到30％；在控温大棚中培育6～8个月，待植株生长至高15～20cm，具有5～6片展开叶片时，可定植到田间；D.施肥：15～20d后幼苗生新根，晴天上午采用0.2％～0.3％尿素溶液喷雾后，并用清水淋洗，每7d施肥1次；E.病虫害防治：利用500倍多菌灵、500倍百菌清、800倍甲霜灵复合防病，利用菊酯类杀虫剂除虫。 |
