发明名称 一种土壤抗生素污染的诊断方法
摘要 本发明公开了一种土壤抗生素污染的诊断方法,包括以下步骤:(1)将肝细胞接种到一组抗生素浓度呈梯度分布的培养基中培养,培养一段时间后检测培养基中肝细胞分泌的酶的活性;(2)建立培养基中抗生素浓度与所述酶的活性之间的关系曲线;(3)将肝细胞接种到含待测土壤浸提液的培养基中培养,培养一段时间后检测相应酶的活性,根据关系曲线计算得到待测土壤中抗生素的浓度;所述酶为乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶或丙氨酸氨基转移酶。本发明具有灵敏、低廉和简便的优点,不仅能检测土壤中抗生素的浓度,又能反映土壤中抗生素的生物毒性。
申请公布号 CN104531835B 申请公布日期 2016.08.24
申请号 CN201410764095.4 申请日期 2014.12.12
申请人 浙江大学 发明人 杨肖娥;刘娣;卢玲丽;冯英;李廷强
分类号 C12Q1/52(2006.01)I;C12Q1/42(2006.01)I;C12Q1/32(2006.01)I 主分类号 C12Q1/52(2006.01)I
代理机构 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人 胡红娟
主权项 一种土壤抗生素污染的诊断方法,包括以下步骤:(1)将肝细胞接种到一组抗生素浓度呈梯度分布的培养基中培养,培养一段时间后检测培养基中肝细胞分泌的酶的活性;(2)建立培养基中抗生素浓度与所述酶的活性之间的关系曲线;采用线性回归或一元二次方程拟合建立关系曲线;所述关系曲线为:y<sub>1</sub>=0.1258x<sub>1</sub>+146.67,R<sup>2</sup>=0.9591,0≤y<sub>1</sub>≤2500;y<sub>1</sub>=0.0002x<sub>2</sub>+0.9604,R<sup>2</sup>=0.8757,0≤y<sub>1</sub>≤2500;y<sub>1</sub>=0.0091x<sub>3</sub>+2.685,R<sup>2</sup>=0.9677,0≤y<sub>1</sub>≤500;y<sub>2</sub>=0.1009x<sub>1</sub>+69.717,R<sup>2</sup>=0.8727,0≤y<sub>2</sub>≤2500;y<sub>2</sub>=0.0003x<sub>2</sub>+0.9681,R<sup>2</sup>=0.9135,0≤y<sub>2</sub>≤2500;y<sub>2</sub>=0.0025x<sub>3</sub>+3.1936,R<sup>2</sup>=0.9552,0≤y<sub>2</sub>≤2500;y<sub>1</sub>为四环素的浓度,单位为μg·L<sup>‑1</sup>;y<sub>2</sub>为青霉素的浓度,单位为μg·L<sup>‑1</sup>;x<sub>1</sub>为乳酸脱氢酶的活性,单位为U/L;x<sub>2</sub>为碱性磷酸酶的活性,单位为Kim unit/100ml;x<sub>3</sub>为丙氨酸氨基转移酶的活性,单位为卡门氏单位;R<sup>2</sup>为相关系数;(3)将肝细胞接种到含待测土壤浸提液的培养基中培养,培养一段时间后检测相应酶的活性,根据关系曲线计算得到待测土壤中抗生素的浓度;所述酶为乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶或丙氨酸氨基转移酶。
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