基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条

摘要

本发明公开了一种基于均相化学发光技术的快速诊断试纸条，包括PVC底板、样品垫、玻璃纤维垫、包被C线以及T线的硝酸纤维素膜、吸水垫；玻璃纤维垫中包被有偶联了特异性抗体Ⅰ的供体微球；硝酸纤维素膜的T线为偶联了特异性抗体Ⅱ的受体微球，硝酸纤维素膜的C线为偶联了能与所述特异性抗体Ⅰ相结合的特异性抗体Ⅲ的受体微球；所述特异性抗体Ⅰ和特异性抗体Ⅱ均能与待测蛋白特异性结合，且结合在待测蛋白质的不同表位。该诊断试纸条具有特异性强、灵敏度高、快捷、简便、可定量，适合快速诊断等特点。

主权项

基于化学发光技术的快速诊断试纸条，其特征是：包括PVC底板(1)、样品垫(2)、玻璃纤维垫(3)、包被C线(6)以及T线(7)的硝酸纤维素膜(4)、吸水垫(5)；在PVC底板(1)的上表面固定设置硝酸纤维素膜(4)，在硝酸纤维素膜(4)的两侧分别设有玻璃纤维垫(3)和吸水垫(5)；除玻璃纤维垫(3)的右端下表面与硝酸纤维素膜(4)的左端上表面固定相连之外，玻璃纤维垫(3)的其余下表面与PVC底板(1)的上表面固定相连；除吸水垫(5)的左端下表面与硝酸纤维素膜(4)的右端上表面固定相连之外，吸水垫(5)的其余下表面与PVC底板(1)的上表面固定相连；在玻璃纤维垫(3)的左侧还设有样品垫(2)，除样品垫(2)的右端下表面与玻璃纤维垫(3)的左端上表面固定相连之外，样品垫(2)的其余下表面与PVC底板(1)的上表面固定相连；玻璃纤维垫(3)中包被有偶联了特异性抗体Ⅰ的供体微球；玻璃纤维垫(3)的制备方法为：将偶联了特异性抗体Ⅰ的供体微球用释放缓冲液稀释至浓度为80～100μg/ml，喷至玻璃纤维垫(3)上，用量为：1～5μl/cm；所述释放缓冲液为：在100ml的10～100mmol/L、pH 7.4的磷酸盐缓冲液或硼酸盐缓冲液中，加入10～40g蔗糖、3～10g海藻糖、0.5～1g的N，O‑双三甲硅基乙酰胺、0.2～0.5g庆大霉素；硝酸纤维素膜(4)的制备方法为：将偶联了特异性抗体Ⅱ的受体微球用分析缓冲液稀释至浓度为200～300μg/ml，然后喷至硝酸纤维素膜(4)的T线(7)位置；用量为：1～1.5μl/cm；将偶联了能与所述特异性抗体Ⅰ相结合的特异性抗体Ⅲ的受体微球用分析缓冲液稀释至浓度为200～300μg/ml，然后喷至硝酸纤维素膜(4)的C线(6)位置；用量为：1～1.5μl/cm；所述分析缓冲液为：在100ml的25mM、pH7.4的HEPES缓冲液中加入100～500mg的Dextran‑500，加入NaCl直至其浓度为10～100mM、加入0.1～1g的BSA、0.01～0.05g的牛γ‑球蛋白、0.001～0.5g的Tween‑20、0.01～0.05g的Proclin‑300；所述特异性抗体Ⅰ和特异性抗体Ⅱ均能与待测蛋白特异性结合，且结合在待测蛋白质的不同表位。