一种NovQ芳香族异戊烯基转移酶催化合成维生素K₂的方法

摘要

本发明公开一种NovQ芳香族异戊烯基转移酶催化合成维生素K₂的方法，(1)维生素K₃溶解于乙醇水溶液中，加入NaBH₄，在N₂保护下，控制温度不超过50℃，搅拌反应至体系呈淡绿色透明液体，中和至pH4.0后，用乙酸乙酯萃取产物，浓缩后冷冻结晶，过滤除清液得到维生素K₃氢醌；(2)将维生素K₃氢醌和DMAPP加入酶促反应体系中，反应在密闭和N₂保护条件下进行，反应完成后，加入Fe³⁺，去除N₂保护，充分氧化后，使用乙酸乙酯萃取得到产物。本发明核心环节为生物酶催化工程技术，利用廉价的维生素K₃催化合成高值的维生素K₂。本发明生产工艺简单，生产成本低廉，生产过程绿色环保。

主权项

一种NovQ芳香族异戊烯基转移酶催化合成维生素K₂的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)维生素K₃溶解于乙醇水溶液中，加入NaBH₄，在N₂保护下，控制温度不超过50℃，搅拌反应至体系呈淡绿色透明液体，中和至pH4.0后，用乙酸乙酯萃取产物，浓缩后冷冻结晶，过滤除清液得到维生素K₃氢醌；(2)将维生素K₃氢醌和DMAPP加入酶促反应体系中，反应体系包含NovQ芳香族异戊烯基转移酶，pH缓冲液，Mg²⁺，抗氧化剂；反应在密闭和N₂保护条件下进行，反应完成后，加入Fe³⁺，去除N₂保护，充分氧化后，使用乙酸乙酯萃取得到产物；所述的NovQ芳香族异戊烯基转移酶为重组NovQ芳香族异戊烯基转移酶或天然NovQ芳香族异戊烯基转移酶，浓度为0.1～4g/L。