主权项 |
一种预防天女木兰芽组培褐化的培养基配方及方法,其特征包括以下步骤:(1)取材:于春季和夏初取顶芽和侧芽,芽长度为0.5~1.0cm,放入洗洁精溶液中浸泡20min,流水冲洗2h,然后在超净工作台上用质量分数为75%的乙醇对其表面消毒30s,用无菌水冲洗2~3次,然后用0.1% HgCl<sub>2</sub>处理7~8min,用无菌水冲洗5~6次,接种;(2)一种预防天女木兰无菌苗褐化培养基配方,其特征包括如下组分:在B5培养基中添加细胞分裂素6-苄基腺嘌呤0.5mg/L 、生长素萘乙酸0.3mg/L、维生素C 300~500mg/L、谷胱甘肽100~150mg/L、苯甲酸钠30~50mg/L和蔗糖30g/L,调pH 5.6~5.8;(3)继代培养基配方,其特征包括如下组分:在B5培养基中添加细胞分裂素噻苯隆0.3mg/L、萘乙酸0.3 mg/L、维生素C 300~500mg/L、谷胱甘肽100~150 mg/L、苯甲酸钠30~50 mg/L、蔗糖3g/L和琼脂7g/L,调pH 5.6~ 5.8;(4)生根培养基配方,其特征包括如下组分:在1/2 B5培养基中添加萘乙酸0.5mg/L、维生素C 300mg/L、谷胱甘肽 50mg/L 、苯甲酸钠30mg/L、活性炭500 mg/L、蔗糖3g/L和琼脂7g/L,调pH 5.6~ 5.8;(5)炼苗移栽:获得的生根试管苗的培养瓶盖打开,在培养室内放置3d后,用镊子将组培苗取出,洗去粘附在根部的培养基,在温室内移栽至V(苔藓):V(蛭石)=1:1的基质中,移栽前将基质用质量分数为0.3%高锰酸钾溶液喷洒消毒;移栽后温度保持在18~20゜C,相对湿度在85~90%,炼苗过程中逐渐增强光照强度,两周后长出新不定根、新叶,移栽成活率85%~90%。 |