一种基于自发光激发的雌二醇光电化学传感器的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种基于功能纳米材料构建的具备电致化学发光和光电化学双重信号发达策略的生物免疫传感器的制备方法，所制备的传感器操作简单、携带方便、检测快、成本低，可用于日常生产、生活等领域的对雌二醇的快速、灵敏检测。

主权项

一种基于自发光激发的雌二醇光电化学传感器的制备方法，其特征在于，制备步骤为：（1）电致化学发光工作电极W1的制备：1）以ITO导电玻璃为工作电极，在电极表面滴涂磷酸镍铵微纳材料NH₄NiPO₄溶液，覆盖面积为1 cm × 1 cm，室温下晾干；2）将1）得到的工作电极，浸入电解液中，浸入面积为NH₄NiPO₄所覆盖的面积，利用三电极系统对工作电极进行电化学沉积，沉积后取出工作电极，使用超纯水清洗，4 ℃下避光干燥，制得电致化学发光工作电极W1；所述的NH₄NiPO₄溶液为磷酸镍铵微纳材料水溶液，所述磷酸镍铵微纳材料的制备步骤为：在40mL水中加入2.0~4.0 g铵盐和0.15~0.25 g磷酸盐，完全溶解后，加入0.15~0.25 g二氯化镍，在30~45℃下搅拌10~14h，离心分离，将产品置于50℃下干燥，即得到NH₄NiPO₄；所述的铵盐选自下列之一：氯化铵、溴化铵、磷酸铵、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵；所述的磷酸盐选自下列之一：磷酸铵、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵；所述的电解液为含有鲁米诺的硫酸溶液，所述的电解液中鲁米诺的浓度为1~10mmol/L，硫酸浓度为0.1~1.0 mol/L；所述的三电极系统，包括工作电极、参比电极和对电极，所述的参比电极为饱和甘汞电极，所述的对电极为铂丝电极；所述的电化学沉积过程，采用的电化学方法为循环伏安法，起始电压为‑0.2 V，终止电压为1.5 V，扫速为100 mv/s，循环20~30圈；（2）光电化学工作电极W2的制备：1）以ITO导电玻璃为工作电极，在电极表面滴涂8~12 µL 二氧化钛纳米粒子溶胶TiO₂ NPs，室温下晾干；2）将1）中得到的工作电极放入马弗炉中，在450 ℃下进行退火处理，处理后冷却至室温；3）将2）中得到的工作电极表面滴涂8~12 µL雌二醇抗体溶液，4 ℃下干燥，干燥后用超纯水清洗，4 ℃下干燥，制得光电化学工作电极W2；所述的TiO₂ NPs为1 mg/mL 的二氧化钛纳米粒子水溶液；所述的雌二醇抗体溶液的浓度为300 µg/mL；（3）基于自发光激发的雌二醇光电化学传感器的制备方法：1）将W1和W2面面相对插入电解池中，W1与W2间距为0.5 cm~1.5 cm；2）以Ag/AgCl为参比电极RE、铂丝电极为对电极CE，插入电解池中，与W1和W2共同组成四电极系统；3）在电解池中加入10 mL pH值为11~13的NaOH溶液和0.2 mL 浓度为1 mmol/L的过氧化氢溶液；4）将1）~3）所制得四电极系统以及电解池置于暗盒中，即制得基于自发光激发的雌二醇光电化学传感器。