一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法

摘要

本发明涉及一种高稳定性饲用液体复合酶的制备工艺，首先利用液体深层工业发酵方法产出发酵液，然后分别对单酶进行精制与纯化，制成的均一、稳定、澄清、透明的单酶液可长时间保存，待需要时根据需求将单酶进行任意比例的复配得到稳定的成品酶液。本发明采用先制备稳定的单酶液待需要时进行任意比例的复配的方法，工艺先进，设备简单，操作灵活，复配前的单酶液纯度高稳定性好，可进行长时间的储存，复配后的成品酶稳定性极高，酶液中的蛋白性质接近，解决了现有工艺生产中设备和材料投入成本高、成品酶稳定性低、极易发生沉淀、易受杂质酶影响导致贮存期间酶活大量损失及不能灵活进行任意比例的复配的问题。

主权项

一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于具体包括下列步骤：A、选用高产单酶菌株进行大规模液体深层工业发酵，产出单酶含量较高的发酵液；B、将步骤A液体发酵产出的发酵液过碟片离心机，得到单酶的酶清液；C、将单酶的酶清液过陶瓷膜，截留残留菌体和比酶分子大的颗粒，收集清液得到单酶陶清液；D、将单酶陶清液过有机膜，截留酶分子，排出小分子的杂蛋白、无机盐和部分水，使酶液浓缩，得到单酶浓缩酶液；E、在所得单酶浓缩酶液中加去离子水进行稀释，得到单酶的稀释酶液；F、在所得单酶的稀释酶液中加入沉降剂、稳定剂和防腐剂，并调节pH至4.4～5.5，置于玻璃钢罐体中进行自然沉降；G、通过玻璃钢罐体侧壁上的清液放料口取出沉降好的单酶清液，放置备用；H、按照步骤A～G的方法制备出生产饲用液体复合酶所需要的几种单酶清液；I、在去离子水中加入稳定剂、防腐剂，并调节pH至4.4～5.5，得到稀释液；J、将步骤H中沉降好的多种单酶清液和步骤I中制备的稀释液进行均匀混合，单酶清液与稀释液的混合比例根据实际酶活和酶种类的需要进行配比；所述步骤D中有机膜截留小分子的分子量为8000～10000；所述步骤E中稀释酶液的最终稀释浓度为：纤维素酶3000～5000U/g,其他种类单酶的酶活为3～5万U/g；至此，液体复合酶制备完成；所述步骤A或H中的单酶为非淀粉多糖单酶或植酸酶；所述步骤F中的沉降剂为十二水合硫酸铝钾、硫酸锌，其添加量为重量比稀释酶液:十二水合硫酸铝钾:硫酸锌=100:0.5～0.6:0.3～0.5；所述步骤F中的稳定剂为山梨糖醇、葡萄糖、硫酸镁和乙酸钠，其添加量为重量比稀释酶液:山梨糖醇:葡萄糖:硫酸镁:乙酸钠=100:8～12:3～6:0.8～1.3:3～6；所述步骤F中的防腐剂为苯甲酸钠、山梨酸钾、卡松和氯化钠，其添加量为重量比稀释酶液:苯甲酸钠:山梨酸钾:卡松:氯化钠=100:0.1～0.25:0.4～0.6:0.15‑0.25:10～14；所述步骤I中的稳定剂为山梨糖醇、葡萄糖、硫酸镁和乙酸钠，其添加量为重量比去离子水:山梨糖醇:葡萄糖:硫酸镁:乙酸钠=100:8～12:3～6:0.8～1.3:3～6；所述步骤I中的防腐剂为苯甲酸钠、山梨酸钾、卡松和氯化钠，其添加量为重量比去离子水:苯甲酸钠:山梨酸钾:卡松:氯化钠=100:0.1～0.25:0.4～0.6:0.15～0.25:10～14。