| 摘要 |
Die Erfindung betrifft Verfahren und Substanzen zur gezielten Veränderung genetischer Information auf der RNA-Ebene. Bei den Substanzen handelt es sich um künstlich hergestellte guide-RNAs, die in der Lage sind, endogene Editierungsenzyme, wie hADAR-Enzyme, insbesondere hADAR2 und hADAR1, zu rekrutieren, um gezielt Punktmutationen in ausgesuchten mRNAs einzubringen. Die guide-RNA besteht aus mehreren Segmenten und ist so konstruiert, dass sich einzelne Nukleotide aus unterschiedlichen Segmenten zu einer Doppelhelix paaren und die Nukleotide eines bestimmten Segments innerhalb der guide-RNA eine Haarnadelstruktur bilden. Ferner betrifft die Erfindung das Verfahren zur gerichteten RNA-Editierung, bei dem die guide-RNA in die Zellen transfiziert wird, in denen die RNA-Editierung vorgenommen werden soll. Die Substanzen und das Verfahren können für Reparaturen einzelner, z. B. krankheitsrelevanter Punktmutationen verwendet werden, wie beispielsweise solcher, die zu vorzeitigen Stopp-Signalen führen. Ein Vorteil der Erfindung besteht darin, dass dabei endogene Editierungsenzyme verwendet werden, um gezielte Punktmutationen in die RNA einzubringen. Nur die kurze guide-RNA, die zur Rekrutierung endogener Editierungsenzyme verwendet wird, muss für jede spezielle Fragestellung künstlich hergestellt und ektopisch exprimiert werden. |
