PDX1蛋白诱导人脐带MSCs转分化为胰岛样细胞的方法

摘要

本发明适用于生物医学领域，提供了一种PDX1蛋白诱导人脐带MSCs转分化为胰岛样细胞的方法，包括以下步骤：PDX1目的基因引物设计；构建PDX1重组质粒；重组蛋白的诱导表达；PDX1蛋白诱导人脐带MSCs转分化为胰岛样细胞。

主权项

一种PDX1蛋白诱导人脐带MSCs转分化为胰岛样细胞的方法，包括以下步骤：PDX1目的基因引物设计：提供PDX1目的基因，设计Tat序列和扩增引物，所述扩增引物包括Pdx‑1‑S和Pdx‑1‑A；其中，所述Tat序列为：5’‑TTCATATGtacggtcgtaaaaagcgtcgtcagcgtcgtcgtGGATCCATGACGCCTC‑3’；Pdx‑1‑S的序列为：5’‑attggatccATGAACGGCGAGGAGCAGTA‑3’；Pdx‑1‑A的序列为：5’‑attctcgagTCGTGGTTCCTGCGGcc‑3’；构建PDX1重组质粒：以所述PDX1目的基因为模板进行扩增，获得PDX1基因片段；将所述PDX1基因片段和载体分别进行酶切后，进行连接和转化处理，挑选阳性克隆，获得PDX1重组质粒；重组蛋白的诱导表达：将所述PDX1重组质粒进行诱导表达，获得PDX1蛋白；PDX1蛋白诱导人脐带MSCs转分化为胰岛样细胞：获取人脐带MSCs，在所述人脐带MSCs中加入所述PDX1蛋白，诱导所述人脐带MSCs转分化为胰岛样细胞。