一种斑点荧光免疫渗滤测定古代羊毛织品的检测方法

摘要

本发明涉及文物检测技术领域，公开了一种斑点荧光免疫渗滤测定古代羊毛织品的检测方法，包括：A)阳性对照I、阴性对照II和检测组III的制备；B)向I，II，III的硝酸纤维素膜（NC膜）滴加牛血清蛋白溶液；C)向I，III的NC膜滴加兔抗羊毛角蛋白抗体溶液；向II的NC膜滴加磷酸盐缓冲溶液；D)向I，III的NC膜滴加磷酸盐缓冲溶液进行洗涤；E)向I，II，III的NC膜滴加荧光标记山羊抗兔抗体溶液；F)向I，II，III的NC膜滴加磷酸盐缓冲溶液进行洗涤；G)紫外灯照射检测。本发明采用斑点荧光免疫渗滤的方法来检测古代羊毛织品，操作简单，成本低，灵敏度更高，反应时间短，检测精确性好。

主权项

一种斑点荧光免疫渗滤测定古代羊毛织品的检测方法，其特征在于步骤如下：A)取三个塑料盒，分别在塑料盒盖子的中央打一个孔；在盖底填充两层吸水垫；在吸水垫上面放置一片硝酸纤维素膜；然后在其中两个塑料盒的硝酸纤维素膜上点加1‑2mL浓度为0.5‑3mg/L的羊毛角蛋白溶液，室温下晾干，将上述两个塑料盒标记为I和II，其中I为阳性对照，II 为阴性对照；取文物样并将其在90‑110倍质量的磷酸盐缓冲溶液中溶解1.5‑2.5h，取80‑100μL的上清液，将其点加在剩余的塑料盒的硝酸纤维素膜上，室温下晾干，标记为III；B)向I，II，III的孔下面的硝酸纤维素膜上滴加80‑100μL浓度为0.5‑1.5wt%的牛血清蛋白溶液；C)向I，III孔下面的硝酸纤维素膜上滴加80‑100μL稀释后的兔抗羊毛角蛋白抗体溶液；向II孔下面的硝酸纤维素膜上滴加80‑100μL磷酸盐缓冲溶液；D)向I，III 孔下面的硝酸纤维素膜上滴加80‑100μL磷酸盐缓冲溶液进行洗涤，共滴加三次；E) 向I，II，III孔下面的硝酸纤维素膜上滴加80‑100μL的已稀释100‑400倍的荧光标记山羊抗兔抗体溶液；F) 向I，II，III孔下面的硝酸纤维素膜上滴加80‑100μL磷酸盐缓冲溶液进行洗涤；共滴加三次；G) 将I，II，III放置于波长为365nm的紫外灯下观察结果，I的硝酸纤维素膜上有荧光斑点出现，II的硝酸纤维素膜上没有荧光斑点出现；若III的硝酸纤维素膜上有荧光斑点出现，则说明检测的文物样是羊毛织品。