作为体内造血刺激剂的TAT-HOXB4H重组蛋白质及其医疗组成物

摘要

本发明公开了一种作为体内造血刺激剂的TAT-HOXB4H重组蛋白质及其医疗组成物，涉及一种C-端含有组胺酸标记的HOXB4重组蛋白质。解决了现有技术中由培养液纯化而得到的重组蛋白质产量少且安定性差的技术问题。本发明用以改善造血干细胞移植患者、放射线治疗患者或化疗患者的恢复时间的医疗组成物，至少包含一有效量的TAT-HOXB4H重组蛋白质，该蛋白质的量足以直接用于体内投药，而增加使用者骨髓内造血干细胞的绝对数目。本发明应用于增加骨髓内以及周边血液内的造血干细胞的数目。

主权项

一种包含TAT‑HOXB4H重组蛋白质的组合物在制备用于活体内投药以改善造血干细胞移植患者、放射线治疗患者或化疗患者的恢复时间的药物中的应用，其特征在于：所述组合物至少包含一有效量的TAT‑HOXB4H重组蛋白质，该蛋白质的量系足以增加一有需要的使用者骨髓内造血干细胞的绝对数目，其中所述的TAT‑HOXB4H重组蛋白质是在大肠杆菌宿主表现后，以下述之方法进行纯化：(i)将表现该蛋白质的不纯溶液通入一HisTrap管柱；(ii)冲洗该HisTrap管柱；(iii)将该部分纯化的蛋白质由该HisTrap管柱溶离出，而形成一部分纯化的蛋白质溶液；(iv)将该部分纯化的蛋白质溶液通入一MonoSP管柱；(v)冲洗该MonoSP管柱；(vi)将纯化的蛋白质，呈变性形式，由该MonoSP管柱溶离出；并利用疏水性化合物将溶离出的变性蛋白质以下列步骤再折迭：(i)将该溶离出的变性蛋白质与一疏水性化合物溶液混合形成一蛋白质与疏水性化合物溶液；(ii)将该蛋白质与疏水性化合物溶液去盐而得一蛋白质与疏水性化合物去盐溶液；(iii)利用超过滤制程以1000～2500g/min离心速度，依序将缓冲液置换为含1mM、2mM、3mM、4mM及5mMβ‑环糊精的缓冲液，将该疏水性化合物由该蛋白质与疏水性化合物去盐溶液中移除；并且该蛋白质于纯化后储存在IMDM培养基或DMEM培养基中，以提高纯化蛋白质之安定性。