发明名称 一种启动子文库的构建方法及其应用
摘要 本发明公开了一种启动子文库的构建方法及其应用,构建方法包括如下步骤:1)根据原核生物启动子的保守区、半保守区、随机序列和转录起始位点,设计出具有启动子特征的寡核苷酸序列;2)、将步骤1)设计得到的寡核苷酸序列经退火、延伸形成双链,再连接到带有报告基因的载体上,得到启动子的突变库;3)、将步骤2)得到的启动子的突变库转入到宿主细胞中,涂布到相应抗性的平板中,得到启动子文库。本发明采用人工设计的具有启动子特征的寡核苷酸序列,通过分子聚合和延伸等技术,获得启动子强度跨度理想的启动子文库;该方法快速、高效、廉价、筛选工作量小。
申请公布号 CN105603537A 申请公布日期 2016.05.25
申请号 CN201610138940.6 申请日期 2016.03.11
申请人 南京工业大学 发明人 姜岷;朱兴贵;马江锋;吴明科;高有军
分类号 C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I;G01N21/31(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 主分类号 C40B50/06(2006.01)I
代理机构 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人 王月霞
主权项 一种启动子文库的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:1)、根据原核生物启动子的保守区、半保守区、随机序列和转录起始位点,设计出具有启动子特征的寡核苷酸序列;2)、将步骤1)设计得到的寡核苷酸序列经退火、延伸形成双链,再连接到带有报告基因的载体上,得到启动子的突变库;3)、将步骤2)得到的启动子的突变库转入到宿主细胞中,涂布到相应抗性的平板中,得到启动子文库。
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