发明名称 |
一种启动子文库的构建方法及其应用 |
摘要 |
本发明公开了一种启动子文库的构建方法及其应用,构建方法包括如下步骤:1)根据原核生物启动子的保守区、半保守区、随机序列和转录起始位点,设计出具有启动子特征的寡核苷酸序列;2)、将步骤1)设计得到的寡核苷酸序列经退火、延伸形成双链,再连接到带有报告基因的载体上,得到启动子的突变库;3)、将步骤2)得到的启动子的突变库转入到宿主细胞中,涂布到相应抗性的平板中,得到启动子文库。本发明采用人工设计的具有启动子特征的寡核苷酸序列,通过分子聚合和延伸等技术,获得启动子强度跨度理想的启动子文库;该方法快速、高效、廉价、筛选工作量小。 |
申请公布号 |
CN105603537A |
申请公布日期 |
2016.05.25 |
申请号 |
CN201610138940.6 |
申请日期 |
2016.03.11 |
申请人 |
南京工业大学 |
发明人 |
姜岷;朱兴贵;马江锋;吴明科;高有军 |
分类号 |
C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I;G01N21/31(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C40B50/06(2006.01)I |
代理机构 |
南京经纬专利商标代理有限公司 32200 |
代理人 |
王月霞 |
主权项 |
一种启动子文库的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:1)、根据原核生物启动子的保守区、半保守区、随机序列和转录起始位点,设计出具有启动子特征的寡核苷酸序列;2)、将步骤1)设计得到的寡核苷酸序列经退火、延伸形成双链,再连接到带有报告基因的载体上,得到启动子的突变库;3)、将步骤2)得到的启动子的突变库转入到宿主细胞中,涂布到相应抗性的平板中,得到启动子文库。 |
地址 |
211816 江苏省南京市浦口区浦珠南路30号 |