三叶青侧枝诱导的种苗培育方法

摘要

本发明涉及一种三叶青侧枝诱导培养方法，属于组织培养植物再生技术领域。剪取三叶青带腋芽的茎段，清洗得到无菌材料，接种到初代培养基上，并露出腋芽，培养30-45天，剪取带腋芽带3-6片叶片的侧枝，转接于继代培养基中增殖培养，分离并转入MS培养基中，进行壮苗培养后，进入生根培养基，然后驯化移栽。将本发明应用于三叶青的培育，具有培养快捷、成活率高、苗壮、环境适应性强等优点。

主权项

三叶青侧枝培养方法，其特征在于，以三叶青带腋芽的茎段作为处理对象，进行如下操作：（1）无菌材料：剪取三叶青带腋芽的茎段，清洗得到无菌材料；（2）培养基：以MS或1/2MS作为基础培养基，添加生长素或/和细胞分裂素，分别得到初代培养基、继代培养基和生根培养基，初代培养基、继代培养基与生根培养基中蔗糖含量不同；（3）初代培养：将步骤（1）中的无菌材料接种到初代培养基上，并露出腋芽，培养30‑45天，得到初代无菌苗，含有适量侧枝；（4）继代增殖培养：将初代无菌侧枝分离，剪取带腋芽带3‑6片叶片的侧枝，转接于继代培养基中增殖培养，得继代苗；（5）壮苗生根培育：继代侧枝分离并转入MS培养基中，进行壮苗培养1.5‑3个月后，进入生根培养基，培养10‑20天，得生根无菌苗；（6）驯化：将生根无菌苗移至人工气候室，加水至高于培养基表面，光照驯化培养3‑5天；（7）移栽：将蛭石：草炭土安装2:1的质量比混合，高压灭菌后作为基质，将驯化后的苗洗去培养基，在仅保留顶端叶片的情况下移在基质上，即完成三叶青的培养。