一种酶催化法合成3-O-β-D-半乳糖基甘油酯的方法

摘要

本发明公开了一种酶法制备3-O-β-D半乳糖基甘油脂肪酸酯的方法，该方法以脂肪酶为催化剂，在有机溶剂体系中进行3-O-β-D半乳糖基甘油和脂肪酸的酯化反应，经分离精制后可获得3-O-β-D半乳糖基甘油单酯和二酯。本发明具有反应条件温和、反应选择性较强、所用反应介质较安全、工艺简单、成本低等优点。

主权项

一种酶催化法合成3‑O‑β‑D半乳糖基甘油酯的方法，其特征是，包括以下步骤：酶促酯化反应：脂肪酶加入到含有3‑O‑β‑D半乳糖基甘油和脂肪酸的有机溶剂中，进行酶促酯化反应，然后加入分子筛继续反应；过滤去除脂肪酶；对3‑O‑β‑D半乳糖基甘油酯进行分离纯化，即得；3‑O‑β‑D半乳糖基甘油和脂肪酸的摩尔浓度比为1：8～1：20，脂肪酶的加入量为10~30mg/ml，分子筛的加入量为70~80mg/ml；其中，3‑O‑β‑D半乳糖基甘油的制备方法包括以下步骤：按D‑半乳糖和甘油摩尔比为1:10加入pH为6.5的磷酸缓冲液中，其中缓冲液含量为底物体积的60%，在40℃水浴锅中预热30min后加入350U/ml的β‑半乳糖苷酶，反应48h；反应结束后，在100℃沸水浴煮3min灭酶活；然后过活性炭柱分离纯化，活性炭经过夜浸泡脱气后，装柱26×600mm，反应液上样20ml，分别用去离子水、3%、9%、20%的乙醇水溶液洗脱，每个梯度洗脱400ml，将9%梯度得到的洗脱液经旋转蒸发、冷冻干燥得到3‑O‑β‑D半乳糖基甘油纯品。