一种可用于艾滋病基因治疗的CRISPR/SaCas9系统

摘要

本发明属于基因工程领域，更具体地说，涉及CRISPR/SaCas9特异性敲除人CCR5基因的方法以及用于特异性靶向CCR5基因的sgRNA。本发明提供了CRISPR/SaCas9特异性敲除人CCR5基因的方法以及用于特异性靶向CCR5基因的sgRNA以及涉及到的CRISPR/SaCas9重组慢病毒和腺相关病毒载体系统和应用。本发明所提供的CRISPR/SaCas9重组慢病毒载体和腺相关病毒载体能够表达针对于人和恒河猴同一基因的CCR5靶点的SaCas9-RNA，使得应用范围更广，效率更高。该制备方法构建简单，靶向效率高，为HIV的基因治疗提供了一种新型的技术。

主权项

在CRISPR/SaCas9特异性敲除人CCR5基因中用于特异性靶向CCR5基因的sgRNA,其特征在于：所述sgRNA在CCR5基因上的靶序列符合5’‑G(21N)NNGRRT‑3’或者5’‑ARRCNN(21N)C‑3’的序列排列规则，下划线代表PAM，21N代表靶位点的21个碱基序列，其对应的DNA序列如SEQ ID NO.1‑4任意一条序列所示，其中SEQ ID NO.1‑3在人与恒河猴的基因位点上保守。