一种耐万古霉素肠球菌的多重荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种耐万古霉素肠球菌的多重荧光定量PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括VanA特异性引物、VanB特异性引物、VanA荧光探针、VanB荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物、DNA聚合酶、VanA基因标准品序列、VanB基因标准品序列。本发明的有益效果为：由于采用了PCR检测方法，能够做到准确、快速、定量的检测。

主权项

一种耐万古霉素肠球菌的多重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：包括VanA特异性引物、VanB特异性引物、VanA荧光探针、VanB荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物、DNA聚合酶、VanA基因标准品序列、VanB基因标准品序列；其中所述VanA基因标准品序列如下：ttgacttcgt tcagtacaat gcggccgtta tcttgtaaaa acatatccac acgggctaga cctctacagc cgagcgcttt atatattttt tttgccgttt cctgtatccg tcctcgctcc；所述VanB基因标准品序列如下：ggatcaaatc cggttgagcc acggtatctt ccgcatccat caggaaaacg agccggaaaa aggctcagag aatgcgatga ttatcgttcc agcagaca；所述VanA特异性引物序列为：VanA上游引物:5′‑ttgacttcgttcagtac‑3′VanA下游引物:5′‑ggagcgaggacggatacagga‑3′；所述VanB特异性引物序列为：VanB上游引物:5′‑ggatcaaatccggttgagc‑3′VanB下游引物:5′‑tgtctgctggaacgataatca‑3′；所述VanA荧光探针:5′‑FAM‑ctagacctctacagccga‑BHQ1‑3′；所述VanB荧光探针:5′‑VIC‑ccgcatccatcaggaa‑BHQ1‑3′；所述脱氧三磷酸核苷混合物为ATP、TTP、CTP、GTP等比例混合。