一种利用重组大肠杆菌无外源L-脯氨酸发酵生产反式-4-羟脯氨酸的方法

摘要

本发明公开了一种利用重组大肠杆菌直接从葡萄糖发酵生产反式-4-羟脯氨酸的方法，该方法是先将突变后的γ-谷氨酸激酶基因(proB₂A)与连有色氨酸串联启动子的反式-4-羟脯氨酸的脯氨酸羟化酶基因(hyp)重组到合适的载体上，构建proB₂A与hyp的共表达体系，然后将此共表达体系导入到大肠杆菌中，得到的重组菌能够实现在无外源L-脯氨酸的条件下，能够高效的利用葡萄糖直接发酵生产反式-4-羟脯氨酸，从而降低了发酵生产反式-4-羟脯氨酸的成本，提高了经济效益。本发明还公开了所述大肠杆菌在羟脯氨酸生产中的应用。

主权项

一株在无外源L‑脯氨酸条件下发酵生产反式‑4‑羟脯氨酸的重组菌的构建方法，是将proB₂A、Ptrp2‑hyp重组到质粒pUC19、pET28a上，构建重组质粒pUC19‑proB₂A‑Ptrp2‑hyp(pUC19‑BH)、pET28a‑proB₂A‑Ptrp2‑hyp(pET28a‑BH),然后该重组质粒转化到大肠杆菌中，实现proB₂A、hyp在大肠杆菌中的共表达，该重组菌能够在无外源L‑脯氨酸条件下发酵生产反式‑4‑羟脯氨酸。