基于共区域化触发链式杂交反应的适体传感器检测腺苷

摘要

本发明公开了一种基于共区域化触发链式杂交反应的适体传感器用于检测腺苷，由生物素化的适体链-1、适体链-2、发卡探针和链霉亲和素修饰的磁性纳米球组成，本发明的适体传感器用于检测腺苷，检测方法为：(1)链酶亲和素化修饰磁球的活化；(2)生物素化适体链-1的固定；(3)腺苷诱导的双适体的共区域化；(4)共区域化触发的链式杂交反应；(5)加入染料SYBR Green I和荧光检测；(6)计算：根据所测得的荧光值计算含有腺苷的待检测物中腺苷的浓度。本发明的适体传感器，通过共区域化诱导的链式杂交反应，降低了传统链式杂交反应的非特异性反应，具有检测灵敏度高、样品使用量小、无需酶放大等优势，可实现对低浓度腺苷的分析检测。

主权项

一种基于共区域化触发链式杂交反应的适体传感器，其特征在于：由生物素化的适体链‑1、适体链‑2、发卡探针和链霉亲和素修饰的磁性纳米球组成，其中，所述生物素化的适体链‑1的序列为：Bio‑Apt‑1：5’‑biotin‑TTTTTTTTTTTT GTG CAA GTA CCA TT TAG ACC ACC TGG GGG AGT AT‑3’，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述适体链‑2的序列为：Apt‑2：5’‑ATA CTC CCC C AGGTGG TGT CTA GGA TTC GGC GTG‑3’，如SEQ ID NO.2所示；所述发卡探针由发卡探针H1和发卡探针H2组成，其中，发卡探针H1的核苷酸序列为：5’‑TGT CTA GGA TTC GGC GTG GGT TAA CAC GCC GAA TCC TAG ACA TGG TAC TTG CAC‑3’，如SEQ ID NO.3所示；发卡探针H2的核苷酸序列为：5’‑TTA ACC CAC GCC GAA TCC TAG ACA GTG CAA GTA CCA TGT CTA GGA TTC GGC GTG‑3’，如SEQ ID NO.4所示。