一种可视化微区多色显影塑料基生物芯片的制备方法

摘要

本发明涉及生物芯片领域，具体地涉及一种利用表面微区选择性催化沉积技术制备可视化多色显影塑料基生物芯片的方法。所述方法包括步骤：1)塑料基片表面活化处理；2)探针分子的选区固定；3)基片的首次封闭；4)靶标物的分区捕获；5)信号触发单元―催化剂的选区引入；6)基片二次封闭；7)芯片表面的微区选择性多色显影处理。本发明的优越性在于由此所制备的多色显影生物芯片具备低成本、易操作、易携带、高通量以及易分析等优点，是实施现场快速检测与分析的理想工具。

主权项

制备可视化微区多色显影塑料基生物芯片的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)塑料基片表面活化处理：将塑料基片放入紫外臭氧或氧等离子体系统中辐射，使其表面产生高密度活性基团，然后浸入活化溶液中活化处理，冲洗基片表面，并将基片吹干待用；2)探针分子的分区固定：利用内嵌多条微通道的PDMS模板或通过喷墨打印方式将含有不同探针分子的缓冲溶液定位引入到基片表面的不同区域从而形成多个不同的“识别区”，然后温育，从而将探针分子固定在基片表面形成分区阵列，再用清洗溶液冲洗基片表面；3)基片的首次封闭：根据探针分子和靶标物或信号分子的类型，将基片表面浸入封闭型溶液，并温育，钝化和封闭基片表面以避免靶标物或信号分子在基片表面的非特异性吸附，然后用缓冲液冲洗基片表面，并将基片吹干待用；4)靶标物的分区捕获：利用PDMS模板将含有多种目标分子的样品溶液同时引入到基片表面固定有不同探针分子的“识别区”，所述PDMS模板的一面内嵌多条微通道，另一面沿通道间隔分布数个惯穿孔道作为液体进出模板的通道，既可全通道又可分段输送样品，其引入方向垂直于探针分子阵列以形成交叉的点阵型反应区域，然后将基片温育，使靶标分子或信号分子与探针分子充分结合，再用同样的缓冲溶液冲洗基片；5)信号触发单元―催化剂的分区引入：继续利用上述特殊设计的PDMS模板把不同信号触发单元―催化剂定向、分段、可控地引入到基片表面指定的反应区域，并充分结合，然后再定向清洗相应的通道，去掉PDMS模板，最后用缓冲液彻底冲洗整个基片；6)基片二次封闭：在基片显影处理之前，根据不同显影反应的特点，将其浸入或分区域滴加封闭型溶液，然后用清洗型溶液和去离子水彻底冲洗基片，最后将基片吹干待用；7)基片分区多色显影处理：根据靶标物或信号分子的数量以及“识别区”在基片表面的分布，通过将基片交替浸入几种不同显影液或将不同显影液滴加到基片表面各个识别区，选择并搭配合适的显色系统以实现微区选区多色催化显影。