轮叶蒲桃离体培养和快速繁殖的方法

摘要

本发明涉及一种轮叶蒲桃离体培养和快速繁殖的方法，包括下述步骤：取轮叶蒲桃外植体经表面消毒、初代培养、增殖培养、壮苗培养和生根培养获得再生试管苗，并进行栽种。本发明极大加快了轮叶蒲桃的繁殖速度，年繁殖系数为1：100000，成本由原来的每株500元，降低至每株2～3元，且不受季节限制，环境易控，适合全国各地，生产得到的轮叶蒲桃种苗品质高，一致性好。

主权项

轮叶蒲桃离体培养和快速繁殖的方法，取轮叶蒲桃外植体经表面消毒、初代培养、增殖培养、壮苗培养和生根培养获得再生试管苗，并进行栽种，其特征在于按下列步骤进行：a、选择生长健壮，无病虫害轮叶蒲桃带腋芽的枝条作为起始外植体，用洗洁精擦洗表面后，流水冲洗20分钟，再进行消毒处理；b、将消毒处理后的外植体接种到初代培养基上，进行初代培养；所述的初代培养基为：改良WPM+BA0.15~0.25mg•L^‑1+NAA0.15~0.25mg•L^‑1+蔗糖25~35g•L^‑1+琼脂4~12g•L^‑1；c、将初代培养的无菌苗转入增殖培养基，该增殖培养基为：改良WPM+BA0.1~1.5mg•L^‑1+NAA0.01~0.5mg•L^‑1+蔗糖20~40g•L^‑1+琼脂4~12 g•L^‑1，诱导不定芽；d、将诱导出的丛生芽分切后，转移至壮苗培养基，进行壮苗培养；所述的壮苗培养基为：改良WPM+BA0.15~0.25mg•L^‑1+IBA0.15~0.25mg•L^‑1+蔗糖25~35 g•L^‑1+琼脂4~12 g•L^‑1；e、将经壮苗培养生长到2.5cm以上的试管苗分切后，转移至生根培养基中，该生根培养基为：1/2改良WPM+IBA0.05~1.5 mg•L^‑1 +蔗糖15~35g•L^‑1+琼脂4~12g•L^‑1；f、对所得的生根试管苗进行清洗，移至珍珠岩、草炭土的混合基质中进行栽种；上述改良WPM培养基的大量元素配方为：NH₄NO₃ ：100mg•L^‑1；Ca(N O ₃)₂·4H₂O ： 226mg•L^‑1；CaCl₂·2H₂O ：36mg•L^‑1；MgSO₄·7H₂ O ：200mg•L^‑1；KH₂PO₄ ：100mg•L^‑1；K₂SO₄：190mg•L^‑1；微量元素、铁盐、有机元素含量不变。