一种从十二指肠中提取硫酸乙酰肝素的工艺

摘要

本发明公开一种从十二指肠中提取硫酸乙酰肝素的工艺，该方法以猪的十二指肠为原料，该工艺以生物酶与酸碱处理方法相结合，经过猪十二指肠→绞碎→酶解→加热→离心→树脂吸附→洗脱→沉淀→碱加热→酸处理→低倍沉淀→氧化→沉淀→真空干燥得到符合规定的硫酸乙酰肝素。本发明方法工艺易于操作，生产成本低，产品稳定性高，适合大规模生产；本发明的产品质量可控、制备工艺先进、化学纯度高，能有效提高收率。

主权项

一种从十二指肠中提取硫酸乙酰肝素的工艺，其特征在于，该工艺包括：步骤一，将十二指肠解冻，去除多余油脂，洗净绞碎，得到肠浆；步骤二，在搅拌状态下加入三倍量的水，调节温度52‑65℃，pH9.5‑10.5,加入1%的碱性蛋白酶，酶解8‑12小时，得混合料液；步骤三，将混合料液pH调至7.0，温度升至80‑90℃，加热10分钟；步骤四，将混合料液降温至室温，离心，收集离心液；步骤五，离心液中加入10%的A98树脂，在60℃水浴中吸附3‑5小时；步骤六，将吸附完的树脂清洗干净，加入3倍量的2.5%的氯化钠溶液，分三次加入，每次搅拌30分钟，洗脱液收集，再加入3倍量的6%的氯化钠溶液，分三次加入，每次搅拌60分钟，洗脱液收集；步骤七，将收集的6%氯化钠洗脱液，加入5%的氯化钠，1.2‑1.6倍药用乙醇沉淀；步骤八，将沉淀物溶解为5%的浓度，pH调至10.0‑11.0，温度80‑90℃，加热30分钟，放置室温，用0.45微米的滤膜过滤，加入3%氯化钠，料液体积的1.2‑1.6倍药用乙醇沉淀；步骤九，将沉淀物溶解为10%的浓度，温度0‑5℃，用3mol/L的盐酸将pH调至0.5‑2.0，低温离心，收集上清液，加入3%氯化钠，1.2‑1.6倍药用乙醇沉淀；步骤十，将沉淀物溶解为10%的浓度，温度40℃‑45℃，pH6.5‑7.0，加入10%氯化钠，0.5‑0.7倍药用乙醇沉淀；步骤十一，将沉淀物溶解为10%的浓度，温度40℃‑45℃，pH6.5‑7.0，加入10%氯化钠，0.9倍药用乙醇沉淀；步骤十二，将沉淀物溶解为15%的浓度，温度30℃‑35℃，pH10.0‑10.5，加入1%H₂O_2, 氧化10小时，经0.22微米、0.1微米滤膜双重过滤；步骤十三，将沉淀物溶解为10%的浓度，温度40℃‑45℃，pH6.5‑7.0，加入2%氯化钠，1.2‑1.6倍药用乙醇沉淀；步骤十四，将沉淀物研磨、真空干燥24小时。