重组质粒pNZ8048-plnD的构建方法

摘要

本发明公开一种重组质粒pNZ8048-plnD的构建方法，以植物乳杆菌ZJQ基因组为模板，PCR扩增plnD目的基因，将扩增得到的基因片段用PCR产物纯化试剂盒纯化特异性扩增条带，将纯化后的PCR产物和质粒pNZ8048经NcoI和Hind III双酶切后纯化，16℃连接过夜，得到重组质粒pNZ8048-plnD。本发明构建的重组质粒pNZ8048-PlnD，能在植物乳杆菌ZJ316（缺乏调控蛋白PlnC和PlnD）中表达。该体系有助于研究和探讨PlnC在植物乳杆菌ZJ316中的转录调节机制，进而有助于揭示PlnD对植物乳杆菌ZJ316细菌素合成代谢调节机制，为植物乳杆菌ZJ316群体感应模式研究提供理论依据，也为植物乳杆菌ZJ316细菌素高产研究提供一种创新思路，在植物乳杆菌ZJ316细菌素的开发和商业运用上也具有十分重要的意义。

主权项

一种重组质粒pNZ8048‑plnD的构建方法，其特征在于以植物乳杆菌ZJQ基因组为模板，PCR扩增plnD目的基因，将扩增得到的基因片段用PCR产物纯化试剂盒纯化特异性扩增条带，将纯化后的PCR产物和质粒pNZ8048经NcoI和Hind III双酶切后纯化，16℃连接过夜，得到重组质粒pNZ8048‑plnD。