| 发明名称 | 一种水稻光敏不育基因pms3检测和分型方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种水稻光敏不育基因pms3检测和分型方法，包括以下步骤：步骤一、提取水稻种子或叶片中基因组DNA；步骤二、检测用通用引物、野生型(58-P)和突变型(58S-P)NFQ特异性探针的设计与合成，将引物稀释到36微摩尔，探针稀释到8微摩尔备用；步骤三、建立PCR体系、扩增与分析；步骤四、通过步骤三的分析结果，对水稻光敏不育基因pms3进行分型，计算水稻光敏不育基因pms3中突变型(58S-P)的纯度；本发明的方法能快速鉴别水稻pms3不育系，具有检测灵敏度高、特异型好、检测时间短，可在1-2小时内完成对pms3基因野生型和突变型的检测和分型。 | ||
| 申请公布号 | CN105463072A | 申请公布日期 | 2016.04.06 |
| 申请号 | CN201510671494.0 | 申请日期 | 2015.10.13 |
| 申请人 | 安徽出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 发明人 | 宗凯;姚剑;周莉质;陈雪娇;李云飞;孙娟娟;余晓峰;郑海松;吕侠影;王满满 |
| 分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 代理机构 | 合肥鼎途知识产权代理事务所(普通合伙) 34122 | 代理人 | 叶丹 |
| 主权项 | 一种水稻光敏不育基因pms3检测和分型方法，其特征在于：所述检测和分型方法包括以下步骤：步骤一、提取水稻种子或叶片中基因组DNA；步骤二、检测用通用引物、野生型(58‑P)和突变型(58S‑P)NFQ特异性探针：上游引物PGMS‑F:GGTGAAGCAAAGAAGTGCATTG下游引物PGMS‑R:CTGAACTGCGTGTTGATAAAAATTTT野生型58‑P探针:FAM‑TTGTGTACCATCCATCAAG‑NFQ突变型58S‑P探针:FAM‑TTGTCTACCATCCATCAAG‑NFQ将引物稀释到36微摩尔，探针稀释到8微摩尔备用；步骤三、建立PCR体系；所述建立PCR体系，荧光PCR反应体系由下列重量份的物质组成：<img file="FDA0000823745860000011.GIF" wi="1014" he="727" />步骤四、扩增与分析；所述扩增，PCR扩增条件为：95℃/1min，95℃/10sec，60℃/25sec，98℃10min,其中95℃/10sec至60℃/25sec过程进行50个循环；所述分析，通过数字PCR分析系统可以得出待检水稻中的光敏不育基因pms3中野生型(58‑P)和突变型(58S‑P)各自基因拷贝数，计算水稻光敏不育基因pms3中突变型(58S‑P)占比，即纯度。 | ||
| 地址 | 230022 安徽省合肥市屯溪路329号 | ||