| 主权项 |
一种大豆组培分化苗的生根方法，包括以下步骤： （1）分化芽苗的生根诱导：将组织培养苗分化诱导产生若干不定芽簇时，将芽高>1.5cm的芽苗切割下来，再接种在MS+0.5mg/L IBA的培养基上诱导培养1‑3天，经过生根诱导的芽苗再转移到生根培养基上培养两周就会形成1‑3mm的根，每个芽苗长成2‑5条根不等，根的平均长度为 2‑3cm；其中，生根培养基：B5、2.0‑3.0%蔗糖、3mM MES、50‑100mg/L天冬氨酰、100mg/L焦谷氨酸、25‑50mg/L叶酸，培养基的pH为5.4‑5.6，且B5的用量为1/4标准含量；（2）生根苗的移栽：生根的芽苗由组培瓶转移到被灭菌的草炭土中，加盖塑料地膜保湿保温，光照强度从1000Lux开始，然后逐渐增强到2500‑3500Lux进行炼苗，炼苗期间使用MS液体培养基，浇水1‑2次，每次20‑30mL；2%的普立特肥浇水1‑2次，每次20‑30mL；炼苗后的大豆组培苗移送到温室栽植培养；所述组织培养苗分化诱导的方法，包括以下步骤：使用大豆中熟品种或早熟品种进行组织培养：将发芽后种子的剥离子叶节放置在芽分化培养基上，诱导子叶节形成芽原基的分化，随后在芽生长培养基上形成不定芽，并生长成若干不定芽簇；其中，芽分化培养基：B 5、 1.0‑3.0% 蔗糖、1.0‑3.0mM MES、0.2%凝胶、1.0‑3.0 mg/L BAP，培养基的pH值为5.6‑6.0；芽生长培养基：MS、2.0‑3.0%蔗糖、3.0mM MES、1.0mg/L ZT、0.1‑0.2mg/L IAA、0.1‑0.8 mg/L GA3，培养基的pH 5.6‑5.8；所述组织培养苗分化诱导和生根诱导的培养条件为：培养室温度控制夜间18℃，10小时，白天23℃，光照控制14小时，光照强度范围1000‑3500Lux。 |
