发明名称 一种香樟品种涌金植株再生的方法
摘要 一种香樟品种‘涌金’植株再生的方法,包括下列步骤:(1)采集香樟品种‘涌金’当年抽的新梢,带回实验室后去除叶片,剪成带有1~2个带腋芽的茎段,无菌化后接种至含有6-苄氨基腺嘌呤和吲哚丁酸的MS培养基中诱导腋芽的形成;(2)将长势良好的‘涌金’腋芽连同茎段接种至含有6-苄氨基腺嘌呤和吲哚乙酸的MS培养基中进行继代和增殖培养;(3)将生长幼嫩、平均芽长为2.0cm左右、长势良好增殖形成的丛生芽用解剖刀切割后接种至含有吲哚丁酸的1/2MS培养基中诱导不定根的形成。本发明克服了腋芽诱导与生长困难、继代与增殖新叶黑死、脱落和生长势衰弱的现象,使得无菌材料长期继代,从而能够大量增殖。诱导产生的丛生芽生势旺盛、遗传性状与母本一致。
申请公布号 CN103782906B 申请公布日期 2016.03.30
申请号 CN201310737749.X 申请日期 2013.12.30
申请人 宁波城市职业技术学院;宁波市林业局林特种苗繁育中心 发明人 何月秋;王建军
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种香樟品种涌金植株再生的方法,其特征在于,包括下列步骤:(1)采集香樟品种涌金当年抽的新梢,带回实验室后去除叶片,剪成带有1~2个腋芽的茎段,用洗洁精清洗4~5min,流水冲洗30min以上,在超净工作台上用75%的酒精消毒30s,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞根据茎段直径大小消毒8~12min,无菌水冲洗4~5次,滤纸吸干水分,切去茎段褐化部分,接种至无激素的MS培养基中,挑选无菌茎段作为腋芽诱导的外植体,接种至含有6‑苄氨基腺嘌呤和吲哚丁酸的MS培养基中,20d后腋芽开始萌动并逐渐展叶、伸长;外植体采集的时间是8月份,所述含有6‑苄氨基腺嘌呤和吲哚丁酸的MS培养基的添加配比为6‑苄氨基腺嘌呤1.0mg/L、吲哚丁酸0.02mg/L、蔗糖30%;(2)将长势良好的涌金腋芽连同茎段接种至含有6‑苄氨基腺嘌呤和吲哚乙酸的MS培养基中腋芽能够正常生长和增殖,30d后平均有效芽最多可达到6.5个,此步骤中的含有6‑苄氨基腺嘌呤和吲哚乙酸的MS培养基中添加6‑苄氨基腺嘌呤3.0mg/L、吲哚乙酸0.05mg/L、蔗糖30%;(3)将生长幼嫩、平均芽长为2.0cm、长势良好增殖形成的丛生芽用解剖刀切割后成单芽接种至含有吲哚丁酸的1/2MS培养基中诱导不定根的形成,30d后最高生根率为41.3%,继续培养30d后将再生植株移栽至泥炭∶珍珠岩=3∶1的基质中移栽一个月;上述过程所采用的培养条件为:pH值5.8~6.0,温度24~26℃,光照2000Lux,每日光照时间12h,此步骤中含有吲哚丁酸的1/2MS培养基中添加吲哚丁酸0.05mg/L、蔗糖20%。
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