猴头菌丝体标准特征图谱的构建方法及基于标准特征图谱的猴头菌丝体质量检测方法

摘要

本发明公开了一种猴头菌丝体标准特征图谱的构建方法及基于标准特征图谱的猴头菌丝体质量检测方法。方法包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)色谱条件：色谱分离柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；采用梯度洗脱，流动相为甲醇与质量百分比浓度为1％冰乙酸溶液组成的梯度洗脱液；柱温为30-40℃；流速为0.8-1.2ml/min；检测波长为250-260nm；(4)测定：高效液相色谱法的特征图谱。

主权项

一种猴头菌丝体标准特征图谱的构建方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)参照物溶液的制备：用甲醇将麦角甾醇配制成每1mL含0.02—0.10mg麦角甾醇的参照物溶液；(2)供试品溶液的制备：用甲醇将猴头菌丝体供试品配制成每1mL含0.02—0.10g供试品的供试品溶液；(3)高效液相色谱分析：分别精密吸取等量的参照物溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，记录35min的色谱图，得猴头菌丝体特征图谱；其中，步骤(3)所述的高效液相色谱分析中，色谱分离柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A为甲醇，流动相B为质量百分比浓度为1％冰乙酸溶液；采用梯度洗脱方式：时间(min)   流动相A(％)   流动相B(％)0～20          90→100      10→020～35           100          0柱温为30—40℃；流速为0.8—1.2ml/min；检测波长为250—260nm，理论板数按麦角甾醇峰计算≥5000；对多批次猴头菌丝体建立特征图谱，通过分析比较，确定出4个共有特征峰，以与麦角甾醇参照物对应的峰为参照峰，4个特征峰的相对保留时间分别为：0.48、0.81、1.00和1.14，偏差为±10％以内，其中相对保留时间为1.00的峰是与麦角甾醇参照物对应的峰；特征峰相对峰宽为30，阈值为50，最小相对峰面积为1000，最小相对峰高为100；这些共有特征峰构成了猴头菌丝体的特征，作为猴头菌丝体的标准特征图谱。