用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法，包括以下步骤：取活性污泥在培养基上接种，得到菌液；将聚乙烯醇和海藻酸钠加入到蒸馏水中，水浴加热，随后冷却至常温，得到聚乙烯醇凝胶；将菌液离心后,倒掉上清液，取得到的沉淀物与聚乙烯醇凝胶混合，再利用表面皿将混合物均匀涂成膜状；将膜状混合物进行干燥，使其成膜后，将膜放入预先配制好的交联固化溶液中，交联固化后，取出固化完成的膜，即得到用于毒性检测生物传感器的生物膜。本发明的制备方法，步骤简单方便，原料价格低廉，来源可靠无污染，低成本绿色环保，而且制得的生物膜具有较高是生化活性，可以用于水中生物毒性物质的快速定性及定量检测评估。

主权项

一种用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取污水处理厂的活性污泥在培养基上接种，采用更代培养、连续曝气的方式进行培养，得到菌液；所述培养基的成分的组成为：葡萄糖：1000mg/L，NH₄CO₃：538.6mg/L，K₂HPO₄：17.86mg/L，MgCl₂·6H₂O：14.29mg/L，MnSO₄·4H₂O：2.143mg/L，CuSO₄·5H₂O：0.7143mg/L，CaCl₂·6H₂O：0.01786mg/L，FeSO₄·7H₂O：3.571mg/L；所述培养基氨氮浓度为95mgN/L；(2)将聚乙烯醇和海藻酸钠加入到蒸馏水中，其中聚乙烯醇的质量浓度为8～15g/L，海藻酸钠的质量浓度为2～4g/L，水浴加热0.5h，在电动搅拌机的搅拌下，使其完全溶解，随后冷却至常温，得到聚乙烯醇凝胶；(3)将步骤(1)得到的菌液，经高速冷冻离心机在7000rpm/min下离心10min后,倒掉上清液，取得到的沉淀物与步骤(2)得到的聚乙烯醇凝胶以重量比1:4混合，再利用表面皿将混合物均匀涂成膜状；(4)在20～25℃条件下，将步骤(3)得到的膜状混合物干燥0.5～2h，使其成膜后，将膜放入预先配制好的交联固化溶液中，交联固化1～2h，取出固化完成的膜，即得到用于毒性检测生物传感器的生物膜；所述交联固化溶液为H₃BO₃和CaCl₂的混合溶液，其中，H₃BO₃的质量浓度为4g/L，CaCl₂的质量浓度为1g/L。