发明名称 缺苞箭竹中多酚类物质含量的测定方法
摘要 本发明提供了缺苞箭竹中多酚类物质含量的测定方法,该方法包括以没食子酸为多酚类物质标准品绘制标准曲线、缺苞箭竹中多酚类物质的样品溶液制备及缺苞箭竹样品中多酚类物质含量的测定三个步骤,本发明提供的方法,检测限低、准确度高、重现性好、精密高。
申请公布号 CN103558214B 申请公布日期 2016.03.30
申请号 CN201310538431.9 申请日期 2013.11.04
申请人 北京林业大学 发明人 赵莘;段丽娟;高健;李洁;李俊清
分类号 G01N21/78(2006.01)I 主分类号 G01N21/78(2006.01)I
代理机构 北京康思博达知识产权代理事务所(普通合伙) 11426 代理人 王燕;余光军
主权项 缺苞箭竹中多酚类物质含量的测定方法,其特征在于,包括:(1)以没食子酸为多酚类物质标准品绘制标准曲线:配制浓度为80~120μg/mL的没食子酸标准溶液,以梯度体积量取上述没食子酸标准溶液,分别移至容量瓶内,配制成没食子酸系列标准溶液,按没食子酸系列标准溶液与福林酚试剂体积比1:2~6向没食子酸系列标准溶液中分别加入等量的福林酚试剂,5分钟后向加入福林酚试剂后的没食子酸系列标准溶液中按福林酚试剂与Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>溶液体积比1:4~6分别加入等量的Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>溶液,静置5~30分钟后用高纯水定容,配制成为标准曲线溶液,在显色温度为20~40℃的条件下,静置显色25~250分钟;用紫外‑可见分光光度计在检测波长410~900nm测定标准曲线溶液的吸光度,并将测得的吸光度值绘制成为标准曲线,使其回归方程为一次函数,并且相关系数R<sup>2</sup>&gt;0.99;其中,所述Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>溶液的重量分数为5~15%;所述高纯水为去离子水或二次蒸馏水;(2)缺苞箭竹中多酚类物质的样品溶液制备,包括以下子步骤:(2‑1)将缺苞箭竹粉碎,过60~80目的筛子筛分,得到缺苞箭竹粉末;(2‑2)称取(2‑1)中制得的缺苞箭竹粉末,置于提取容器中,按重量比1:20的比例加入重量分数为70%乙醇溶液,在回流温度65~75℃下回流1.5~2.5小时;(2‑3)将(2‑2)中回流后的固液混合物,在转速为4000r/min、温度为25℃的条件下,离心8~12分钟;(2‑4)将(2‑3)中离心后的固液混合物减压过滤,将滤液转移至容量瓶中,用高纯水定容,制备成为样品溶液,按样品溶液与福林酚试剂体积比1:0.5~10向样品溶液中加入福林酚试剂,5分钟后向加入福林酚试剂后的样品溶液中按福林酚试剂与Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>溶液体积比1:4~6加入Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>溶液,静置5~30分钟后用高纯水定容,在显色温度为10~45℃的条件下,静置显色25~250分钟配制缺苞箭竹样品待测溶液,待用;(3)缺苞箭竹样品中多酚类物质含量的测定:用绘制标准曲线时使用的紫外‑可见分光光度计测定(2‑4)中制备的缺苞箭竹样品待测溶液的吸光度值,该吸光度值在标准曲线上所对应的浓度值即为缺苞箭竹样品待测溶液中多酚类物质的浓度,即C<sub>稀释液</sub>,再通过下式换算出缺苞箭竹中多酚类物质的含量,即C<sub>原样品</sub>,C<sub>原样品</sub>=C<sub>稀释液</sub>×V<sub>稀释液</sub>/V<sub>原样品</sub>;其中,C<sub>稀释液</sub>是指(2‑4)中制备的缺苞箭竹样品待测溶液中多酚类物质的浓度;V<sub>稀释液</sub>是指(2‑4)中制备的缺苞箭竹样品待测溶液的体积;C<sub>原样品</sub>是指(2‑4)中制备的样品溶液中多酚类物质的浓度;V<sub>原样品</sub>是指(2‑4)中制备的样品溶液的体积。
地址 100083 北京市海淀区清华东路35号