促进脐带间充质干细胞成骨再生关键基因高表达的方法

摘要

本发明涉及一种促进脐带间充质干细胞成骨再生关键基因高表达的方法，步骤如下：脐带间充质干细胞的分离：获取无菌的脐带，经过前处理用培养液重悬沉淀，计数，以1×10⁶/cm²接种至培养瓶中培养，培养液分别采用a-MEM+10％FBS和a-MEM+5％血小板裂解物+50mg/ml抗坏血酸+10nmol/L胰高血糖素样肽-1。采用本发明的培养体系培养的脐带间充质干细胞作为种子细胞用于骨组织工程治疗骨缺损，避免了脐带间充质干细胞体外成骨诱导的步骤，为临床应用骨组织工程治疗骨缺损缩短了至少14天的时间。

主权项

一种促进脐带间充质干细胞成骨再生关键基因高表达的方法，其特征在于：步骤如下：⑴脐带间充质干细胞的分离：获取无菌的脐带组织，无菌条件下剥离脐带组织的外膜和脐带组织内动、静脉，分离出脐带华通氏胶并剪碎至2‑3mm³，将剪碎的华通氏胶贴于培养瓶底面，1‑4h后向培养瓶内添加适量培养液，培养液分别采用a‑MEM+10％FBS和a‑MEM+5％血小板裂解物+50mg/ml抗坏血酸+10nmol/L胰高血糖素样肽‑1；⑵脐带间充质干细胞的消化、传代，待脐带间充质干细胞长至80％时，采用0.05％的胰蛋白酶+0.02％的EDTA对其进行消化，以1×10⁴cells/cm²传至新的培养瓶中。