中药虎杖提取液中分离纯化白藜芦醇的方法

摘要

本发明公开了植物有效成分提取领域的一种中药虎杖提取液中分离纯化白藜芦醇的方法，本方法利用微生物发酵技术对虎杖提取前进行发酵，再经过醇提水沉，利用80%甲醇回流提取，后加水沉淀杂质；制得上清液进行萃取，然后制备上样液，于中压氧化铝层析柱上进行三次洗脱分离；第一次采用蒸馏水洗脱至无色，第二次用浓度为40～55%乙醇洗脱，第三次采用浓度为70～95%的乙醇洗脱；收集第三次的洗脱液；再使用超临界CO₂萃取仪，对洗脱后得到的白藜芦醇进行超临界CO₂沉析分离，控制压力为17～20MPa、温度为70～80℃，萃取时间在30～40min，最后干燥，最终制得纯度达95～98%高纯度的白藜芦醇产品。

主权项

中药虎杖提取液中分离纯化白藜芦醇的方法，步骤包括发酵、提取、萃取、分离、纯化和干燥，其特征在于：具体步骤如下：发酵：将中药虎杖粉末放入发酵池中，使用培养基进行发酵5～7天，使虎杖苷转化为白藜芦醇；提取：将步骤1中的虎杖粉末连同发酵所得的发酵液转移至提取炉中，并加入浓度为80%的甲醇回流提取3次；每次加入甲醇的体积为发酵液体积的3倍，每次提取后过滤，合并3次过滤所得滤液，并回收甲醇；向回收甲醇后的提取液中加入蒸馏水，搅拌，冷藏、静置24h后，过滤，获取滤液；所加蒸馏水的体积为提取液体积的6倍；离心：将步骤3所得滤液进行离心处理，取上清液；初步萃取：上清液中加入与上清液等体积的乙酸乙酯萃取，萃取3次，合并3次萃取后的乙酸乙酯萃取层；干燥回收乙酸乙酯后所剩残留液，制得白藜芦醇粗品；洗脱分离：加水溶解白藜芦醇粗品制得上样液；上样液上样于中压氧化铝层析柱，进行三次洗脱分离：第一次采用蒸馏水洗脱至无色，第二次用浓度为40～55%乙醇洗脱，第三次采用浓度为70～95%的乙醇洗脱；收集第三次的洗脱液，回收乙醇后进行浓缩，形成浓缩液；精致纯化：使用超临界CO2萃取仪，对步骤6中获得的浓缩液进行沉析分离；超临界CO2萃取仪的压力为17～20MPa、温度为70～80℃，萃取时间在30～40min；收集沉析产物，干燥，制得白藜芦醇。