一种古代羊毛织品双抗夹心法检测试纸的制备方法

摘要

本发明公开了一种古代羊毛织品双抗夹心法检测试纸的制备方法，采用以下步骤：采用柠檬酸钠还原氯金酸的方法制备出金纳米粒子；制备金标兔抗角蛋白抗体；组装试纸条，将样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次组装在PVC底板上，用切刀切割成试纸条，放入带干燥剂的铝箔袋中密封储存；取1g纺织品痕迹样，溶解于50-100ml、PH为8.2的Tris-HCl缓冲液中，搅拌均匀，2h后取一滴上清液滴在组装好的试纸条的样品垫上；5-10min后，检测线和质控线均显出红色，说明样品中含有角蛋白，该纺织品痕迹为羊毛织品的痕迹。相比现有技术，该方法简单快捷，灵敏度高，特异性强，结果直观，更适合考古现场分析。

主权项

一种古代羊毛织品双抗夹心法检测试纸的制备方法，其特征在于采用以下步骤：A)制备金纳米粒子，采用柠檬酸钠还原氯金酸的方法制备出粒径为25‑50nm的金纳米粒子；即将100ml的质量浓度为0.01%的氯金酸溶液水浴加热至沸腾，迅速加入1.0‑1.5ml的质量浓度为1%的柠檬酸钠溶液，煮沸7‑10min，溶液呈现出红色，即制得金纳米溶胶；B) 制备金标兔抗角蛋白抗体，用0.1mol/l的K₂CO₃溶液将100ml的胶体金溶液调节PH至9.2，搅拌的加入兔抗角蛋白抗体20‑50μl，所述抗体浓度为3.15mg/ml；接着加入5ml的质量浓度为1%‑10%的聚乙二醇20000溶液，室温下搅拌5min，然后在9000‑11000r/min下离心40‑60min，弃去上清液；将沉淀溶于0.01mol/l的PH为8.2的三羟甲基氨基甲烷缓冲液，即Tris‑HCl溶液，所述Tris‑HCl溶液中各组分质量浓度比例为0.15%的吐温‑20,1%的牛血清蛋白，5%的蔗糖；于4℃下保存；C) 组装试纸条，用喷膜机将5‑20μl、用PH 8.2的Tris‑HCl溶液稀释100‑400倍的鼠抗角蛋白抗体溶液和羊抗兔抗体溶液分别喷在长2.5cm、宽4mm的硝酸纤维素膜的检测线和质控线上，37℃烘干备用；将用质量浓度比例为0.15%的吐温‑20、1%的牛血清蛋白、5%的蔗糖，PH为8.2的Tris‑HCl溶液稀释10‑20倍的金标记的兔抗角蛋白抗体包被在胶体金结合垫上，37℃烘干备用；将样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次组装在PVC底板上，用切刀切割成4mm宽的试纸条，放入带干燥剂的铝箔袋中密封储存；D)取1g纺织品痕迹样，溶解于50‑100ml、PH为8.2的Tris‑HCl缓冲液中，搅拌均匀，2h后取一滴上清液滴在组装好的试纸条的样品垫上；5‑10min后，检测线和质控线均显出红色，说明样品中含有角蛋白，该纺织品痕迹为羊毛织品的痕迹。