一种水貂阿留申病毒的LAMP检测方法

摘要

本发明公开了一种水貂阿留申病毒的LAMP检测方法，包括DNA模板的提取；LAMP反应引物的设计；LAMP反应；LAMP反应结果检测,经试验得知，特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备的优点。

主权项

一种检测水貂阿留申病毒的LAMP反应引物，其特征在于：所述LAMP检测方法包括以下步骤：a.DNA模板的提取；b.LAMP反应引物的设计；c. LAMP反应；d. LAMP反应检测；所述步骤b包括：选择水貂阿留申病毒VP2基因作为靶基因；根据LAMP引物设计软件网址：http://primerexplorer.jp/e/，将待扩增的DNA 分为六个独立的区域，根据这六个区域分别设计LAMP 反应所需的引物，所述引物包括内引物FIP 和BIP、外引物F3 和B3、环引物LB、LF，共设计五套LAMP引物扩增VP2基因；在LAMP反应时采用以下第一套、第二套、第三套、第四套或第五套LAMP引物扩增VP2基因；第一套为：ADV55‑F3：CCAACCAAGGTAACGCATADV55‑B3：TGTTGTAAATGTAACATGGATGAADV55‑FIP：GCTGGAGTATATGGCAATATGTTGTTTTTTCAACAATGACTTAACTGCGADV55‑BIP：CCGTTGGGAGAAACACTGGGTTTTATACCTATATTGGGTTGGTTTGADV55‑LF：GTGTCTAAAGCAACCTGTAACGA；第二套为：ADV8‑F3：GTTTGGTTACTTTAGAACAAGAGADV8‑B3：TGCTCTCCAAGGAACAAAGADV8‑FIP：TGCTTGGTAGATGCGTTACCTTTTTTATAGACAATGTAACCATAAAGACTGADV8‑BIP：TAACTGCGTCGTTACAGGTTGCTTTTCCCAGTGTTTCTCCCAACADV8‑LB：  ACAACATATTGCCATATACTCCAGC；第三套为：ADV21‑F3：GATAGACAATGTAACCATAAAGACTADV21‑B3：TTGGTTTGGTTGCTCTCCADV21‑FIP：CGACGCAGTTAAGTCATTGTTGATTTTGTAACAGAAACCAACCAAGGTAADV21‑BIP：TACAGGTTGCTTTAGACACTAACAATTTTAAGGAACAAAGCCCAGTGADV21‑LB：CATATACTCCAGCTGCGCCGTT；第四套为：ADV37‑F3：ACCATAAAGACTGTAACAGAAACADV37‑B3：TGTTGTAAATGTAACATGGATGAADV37‑FIP：GTGTCTAAAGCAACCTGTAACGATTTTTAACGCATCTACCAAGCAADV37‑BIP：CCGTTGGGAGAAACACTGGGTTTTATACCTATATTGGGTTGGTTTG；第五套为：ADV46‑F3：AACCAAGGTAACGCATCTADV46‑B3：TGTTGTAAATGTAACATGGATGAADV46‑FIP：GCTGGAGTATATGGCAATATGTTGTTTTTACCAAGCAATTCAACAATGAADV46‑BIP：CCGTTGGGAGAAACACTGGGTTTTATACCTATATTGGGTTGGTTTGADV46‑LF：AACCTGTAACGACGCAGTTAAG。