一种新型海洋微生物低温碱性蛋白酶脱色方法

摘要

本发明涉及一种新型海洋微生物低温蛋白酶脱色方法,包括：D352阴离子交换树脂的处理,低温碱性蛋白酶MP的制备,低温碱性蛋白酶MP脱色步骤。该D352阴离子交换树脂脱色率为85%-93%；能较好地保留蛋白酶的酶活，酶活保留率为92%-99%；并在连续使用6次之后仍具有较好的脱色功能。脱色后的低温碱性蛋白酶MP能更有效广泛地应用于食品工业、医药工业以及环境工程中。

主权项

一种海洋微生物低温碱性蛋白酶MP脱色方法,其特征在于包括下列步骤：1)阴离子交换树脂的处理将大孔型聚苯乙烯带有伯氨基的弱碱型阴离子交换树脂用4wt％的HCl浸泡2‑4h,后用去离子水洗至中性；再用4wt％NaOH浸泡6‑8h，去离子水洗至中性，装于离子交换柱中；2)低温碱性蛋白酶MP的制备将YS‑80菌株接种于含有1.2wt％蛋白胨、2.4wt％酵母粉、0.4wt％甘油、2.5wt％NaCl的GB培养基中,于18℃连续培养48小时，此时检测发酵液中蛋白酶酶活为5000U/ml；然后，在4℃条件下，离心去除菌体，保留上清液,再用超滤浓缩的方式制备不同酶活的低温碱性蛋白酶MP酶液,所述海洋细菌YS‑80，保藏在中国武汉CCTCC，保藏号为CCTCCNO：M209177；3)低温碱性蛋白酶MP的脱色将步骤2制备的低温碱性蛋白酶MP酶液流过步骤1的离子交换柱进行脱色，控制流速为4—8BV/ml,pH值为5—9,温度为20—40℃。