一种骨支架复合材料的制备方法

摘要

本发明属于组织工程学领域，主要涉及一种骨组织工程支架复合材料的制备方法。具体步骤如下：a)去抗原松质骨的制备；b)壳聚糖-β-甘油磷酸钠-胶原溶液表面修饰的去抗原松质骨支架的制备。本发明采用物理化学结合(超声结合冻干)的方法较好的解决了松质骨支架的去抗原问题，尤其是超声处理，通过超声溶液与超声条件的配合最大限度的减少了抗原的存在，并且使去抗原的松质骨支架具备较好的力学性能。

主权项

一种骨组织工程支架复合材料的制备方法，具体步骤如下：a)去抗原松质骨支架的制备：剔除原料骨表面的骨膜、附着组织，并用双蒸水漂洗干净；分割成小骨块，然后在双蒸水中搅拌浸泡7h，得到无血色的骨块；骨块捞出沥干后，置入25℃恒温摇床中，用1:1氯仿/甲醇浸泡12h进行脱脂，然后再用双蒸水反复清洗3次，10‑15min/次；在脱脂清洗处理后，进行超声清洗脱细胞处理，具体处理方法为：将骨块放入含有0.05～0.2wt％的胰酶、0.1～0.3wt％的烷基糖苷和0.1wt％的聚乙二醇的PBS溶液中进行超声，pH为7.4，超声条件为：超声频率25kHz，超声功率为50W，超声时间5min，超声两次，制备成去抗原松质骨支架；b)壳聚糖‑β‑甘油磷酸钠‑胶原溶液表面修饰的去抗原松质骨支架的制备：壳聚糖‑β‑甘油磷酸钠‑胶原溶液，即C/GP/Co溶液；将a)制备的去抗原松质骨支架浸入C/GP/Co溶液中，在37℃水浴中放置15min，去离子水清洗后冷冻干燥，得到C/GP/Co溶液表面修饰的去抗原松质骨支架；所述的C/GP/Co溶液中，壳聚糖的浓度为15mg/ml，β‑甘油磷酸钠的浓度为30mg/ml，胶原的浓度为35mg/ml，pH为7.4；所述C/GP/Co溶液中还包含0.5ng/ml的BMP‑2，35ng/ml的bFGF和50mg/ml的女贞子总苷。